SILAC 用 L-脯氨酸

Thermo Scientific 重和轻氨基酸用于使用细胞培养氨基酸稳定同位素标记 (SILAC) 定量试剂盒通过质谱分析，对蛋白表达进行特异性分析。这是 L-脯氨酸的冻干制剂，足以进行 1 次 SILAC 实验。

用于 SILAC 标记的重和轻氨基酸的一般特点：

•高效—100% 标记可以掺入活细胞蛋白中
• 灵活—精氨酸、赖氨酸、亮氨酸和脯氨酸的重和/或轻氨基酸的不同同位素使得对于从 MS 级蛋白酶中获得的肽进行定量测定成为可能
• 多重功能—精氨酸和赖氨酸的若干可选同位素可用于在各实验中分析多种处理条件
• 高品质添加剂—同位素纯度为 >99% 的重氨基酸

细胞培养氨基酸稳定同位素标记 (SILAC) 是对复合蛋白样品中发生相对差异变化的蛋白进行鉴定和定量测定的有效方法。该方法需要在体内通过代谢途径将“重”¹³C- 或 ¹⁵N 标记氨基酸掺入蛋白中，然后通过质谱 (MS) 对蛋白进行加速和全面的鉴别、表征和定量测定。

用于 SILAC 的 Thermo Scientific 重和轻氨基酸与缺乏必需氨基酸的专业细胞培养基联用。重和轻 L-赖氨酸和 L-精氨酸是最常见的用于胰蛋白酶肽 SILAC 分析的氨基酸。可轻松通过赖氨酸和精氨酸的不同同位素分析多达三种不同的实验条件。对于赖氨酸三重实验，4,4,5,5-D₄ L-赖氨酸和 ¹³C₆¹⁵N₂ L-赖氨酸用于生成与使用轻赖氨酸生成的肽相比质量偏移分别为 4- 和 8-Da 的肽。对于精氨酸三重实验，¹³C₆ L-精氨酸和 ¹³C₆¹⁵N₄ L-精氨酸用于生成与使用轻精氨酸生成的肽相比质量偏移分别为 6- 和 10-Da 的肽。L-亮氨酸是另一种通常用于 SILAC 标记的氨基酸，因为它是蛋白序列中最常见的氨基酸之一。脯氨酸是一种非必需氨基酸，有时添加到 SILAC 培养基中，以防止具有高精氨酸脱氢酶活性的哺乳动物细胞系中发生从重精氨酸至重脯氨酸的代谢转化。

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