Thermo Scientific™ Pierce™ 蛋白 G 色谱纯化柱是一种便捷的即用型预装柱,用于从血清、腹水和细胞培养上清液中分离和纯化哺乳动物多克隆和单克隆抗体。
Pierce 蛋白 G 琼脂糖含有已共价固定至高品质交联 6% 微珠状琼脂糖 (CL-6B) 上的重组蛋白 G。该特殊种类的亲和树脂可提供通用的色谱特点组合,用于从哺乳动物血清样品中获得高得率的全 IgG 和对全 IgG 进行高纯度纯化。琼脂糖微珠的物理和化学特性适用于许多亲和纯化系统。
Pierce 蛋白 G 琼脂糖的特点:
•蛋白 G –固定化蛋白 G 非常适用于从小鼠、人、牛、山羊和绵羊血清中纯化多克隆 IgG(包括人 IgG3 和小鼠 IgG1 同种型)
• 琼脂糖树脂 – 支持物为交联 6% 微珠状琼脂糖 (CL-6B),这是蛋白亲和纯化方法的较常用树脂
• 惰性且稳定 – 优越的生产方法通过不带电荷的抗浸出性共价键固定蛋白 G,因此非特异性结合较低且能够多次使用而不降低得率
• 标准容量 –Pierce 蛋白 G 琼脂糖包含正常上样量的固定化蛋白 G,提供 11 至 15 mg 人 IgG/mL 树脂的结合容量
Pierce 色谱纯化柱与主要自动液相色谱系统或手动注射器处理兼容,可直接连接到 ÄKTA™ 或 FPLC 系统上,而无需额外的接头。每个产品均随附一个附件包,使色谱柱随时可与 Luer-Lok 注射器配件或 1/16” 管配合使用。蛋白 G 纯化柱提供快速、简便和可重现的色谱分离,可再生用于多种用途。
蛋白 G 是源自 G 群链球菌的细菌细胞壁蛋白,现可在大肠杆菌中以重组形式生产。与蛋白A相同,蛋白G可与大多数哺乳动物的免疫球蛋白结合,结合部位主要为其Fc区。天然蛋白G包含两个免疫球蛋白结合位点以及白蛋白和细胞表面结合位点。重组形式的蛋白G中已除去这些白蛋白及细胞表面结合位点,以减少免疫球蛋白纯化过程中的非特异性结合。重组蛋白G分子量约为21.6kDa,但在SDS-PAGE中表观大小为31至34kDa。IgG 结合功能在 pH 值为 5 时较佳,但在近中性条件(pH 值 7.0 至 7.2)下也可高效结合。
与蛋白 A 相比,蛋白 G 可与人、小鼠和大鼠血清中更广泛的 IgG 亚类结合。其中,除了与蛋白A一样能够结合其他类型免疫球蛋白之外,蛋白G还对人IgG3、小鼠IgG1和大鼠的全部三种IgG亚型具有特别强的结合能力。因此,在涉及这些物种和抗体亚型的应用中一般建议采用蛋白G。关于其他物种,蛋白 G 对牛、山羊和绵羊 IgG 的结合能力更强,但对猪、豚鼠、犬和猫 IgG 的结合能力弱于蛋白 A。
Pierce 蛋白 G 琼脂糖使用 Thermo Scientific AminoLink 偶联化学法制备,该方法与传统配体固定方法相比具有多项优势。AminoLink 固定后,琼脂糖珠的糖单体与蛋白 A 上的天然赖氨酸残基通过简单的酰胺键结合。与典型的溴化氰 (CNBr) 固定法不同,AminoLink 方法不引入任何新的化学基团,从而避免了可能导致的非特异性结合,并且形成基本不可逆的稳定结合。所得的高结合容量树脂可保留固定化蛋白的结合功能
仅供科研使用。不可用于诊断程序。