GeneArt™ 定点突变 PLUS 系统可将我们的突变技术提升到一个新的水平,与竞争产品相比,该技术具有以更高的效率在更短的时间内在更大质粒中进行单位点或多位点突变的能力。
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有效—可在长达 14 kb 的 DNA 质粒中的 1、2 或 3 个单独位点中取代、删除或插入多达 3 个核苷酸
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灵活—可进行简并核苷酸的多位点突变和含简并核苷酸的长达 25 个核苷酸或 12 个核苷酸的单位点突变
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高效—首次使用即可获得您的所需突变体;10 Kb 质粒中存在超过 90% 的正确突变体
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快速—使用简单、极少的处理方案通常在不到 3 小时内即可获得您的突变质粒 DNA
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通用型—可使用多种大小的质粒和从任意来源分离的 DNA,无需专用载体、宿主菌株或限制性位点
优化突变方案进一步优化了 GeneArt™ 定点突变系统的效率和多位点能力,从而获得了“PLUS”试剂盒。与第一代 GeneArt™ 定点突变系统一样,DNA 甲基化和扩增步骤整合到单次反应中,无需体外 DpnI 酶切步骤。甲基化和扩增后,扩增 PCR 产物的 15 分钟体外重组反应使菌落输出量增加 3 至 10 倍,从而获得更高突变效率。将突变 DNA 最终转化至 DH5α™ 大肠杆菌细胞中,可对任何甲基化亲本 DNA 进行酶切,仅留下完整的未甲基化突变反应产物。无需纯化步骤或额外的酶切。可于次日选择单个菌落以验证突变。
简单创建所需突变体使用 GeneArt™ 定点突变 PLUS 系统创建依赖于 DNA 甲基化酶、高保真度 DNA 聚合酶、重组酶以及大肠杆菌的天然 McrBC 核酸内切酶的固有特性。使用我们的用于无缝组装和突变的 GeneArt™ 设计工具即可将您的所需突变掺入到引物中(参见下文“电脑模拟设计支持”)。将载体和突变引物相结合,在 PCR、重组和转化后您将获得仅具有所需突变的载体,其效率超过 90%。
电脑模拟设计支持GeneArt™ 定点突变中的一个关键步骤是具有适当同源性和间距的引物的正确设计,以帮助确保质粒成功诱变。为简化和加速设计流程,我们提供了一种免费在线工具(
用于无缝或高阶组装和突变的 GeneArt™ 设计工具)来帮助您通过电脑模拟设计实验。该工具允许您查看质粒序列,设计用于导入所需突变的 DNA 寡核苷酸,为您的突变基因提供更新的氨基酸序列,显示了新构建体的图形表示,并能下载与 Vector NTI™ 软件兼容的 GenBank 格式的注释序列。
仅供研究使用。不得用于人或动物的治疗或诊断用途。
For Research Use Only. Not for use in diagnostic procedures.