LanthaScreen™ TR-FRET ER alpha Coactivator Assay Kit

LanthaScreen™ TR-FRET ER alpha Coactivator Assay Kit 为高通量筛选潜在的雌激素受体 (ER) α 配基（作为配基依赖性辅激活剂募集的激动剂或拮抗剂）提供了一种灵敏且可靠的方法。该试剂盒使用带有谷胱甘肽 S-转移酶 (GST) 标记的 ER α 配基结合域 (ER alpha-LBD)，铽 (Tb) 标记的抗 GST 抗体和均质混合读取检测方式的荧光素标记的辅激活肽。

Agonist Mode
以激动剂模式运行 LanthaScreen TR-FRET ER α 辅激活剂测定，以识别激动剂化合物。将 ER alpha-LBD 添加至配基测试化合物中，然后添加荧光素-辅激活肽和 Tb-抗 GST 抗体的混合物。在室温下孵育一段时间后，可计算 TR-FRET 520:495 nm 发射比，还可将其用于根据化合物的剂量反应曲线确定 EC50。基于 ER α 辅激活因子肽相互作用的生物学原理，该配基 EC50 为一种复合值，表示与受体结合、影响构象变化和招募辅激活因子肽所需的配基数量。

拮抗剂模式
以拮抗剂模式使用 LanthaScreen TR-FRET ER α 辅激活因子检测试剂（鉴定拮抗剂化合物）时，将 ER α-LBD 添加至配基供试化合物中，然后加入激动剂、荧光素辅激活因子肽和铽 (Tb) 标记的抗 GST 抗体的混合物。该模式中使用的激动剂浓度为首次进行激动剂模式检测所确定的 EC80 浓度。