像 Cells-to-CT™ 产品系列的其他产品一样,借助 Cells-to-CT™ 一步法 Power SYBR™ Green 试剂盒,无需 RNA 纯化即可直接使用培养细胞进行表达分析。
该系列的这款新增产品包括 Power SYBR™ Green 一步法 RT-PCR 预混液。RT-PCR 步骤的一步法规格以空前的方式简化了 Cells-to-CT™ “样品至结果”工作流程,而不会降低灵敏度和特异性,具有非凡的价值。
Cells-to-CT 一步法 Power SYBR™ Green 试剂盒的特征为:
•全面 — 优化的工作流程包括使用移除 gDNA 的细胞裂解试剂和 Power SYBR™ Green 一步法 RT-PCR 预混液
• 速度更快 — 7分钟样品制备,包括 DNase 酶处理,而传统 RNA 纯化需要 30-60 分钟
• 简单 — 总共12步(样品制备和实时 RT-PCR 结合)
• 稳健 — 可以对每份样品 10–100,000 个细胞进行基因表达分析;结果与从纯化 RNA 中获得的相当
• 经济实惠 — 含有足够的试剂,可对制备的每份细胞样品进行5次实时 RT-PCR;以经济实惠的价格研究每份样品的多种靶标
简单7分钟样品制备,然后准备进行实时 RT-PCR无论您使用的是孔板还是试管,Cells-to-CT™ 一步法 Power SYBR™ Green 试剂盒均使用简单7分钟样品制备程序。该裂解技术专门设计用于 10–100,000 个培养细胞/样品。细胞先用 PBS 清洗,再于室温下置于裂解液中裂解5分钟,同时进行 DNase 处理。裂解过程在加入终止液,室温孵育2分钟后被终止。现在可以在实时 PCR 仪器上分析裂解物。只需将其添加至包含相关基因引物对的实时荧光定量 RT-PCR 预混液中。此外,裂解物也可以在 –20°C 下储存。由于样品直接在培养孔(96孔或384孔)里接受处理,样品处理错误、样品丢失可能性或转移错误极大程度减少,有利于快速高通量检测流程。与传统的多步骤 RNA 分离方案不同,无需加热、清洗或离心。该试剂盒大大简化了耗时费力的 30–60 分钟流程,将其缩短至7分钟。
完全经过验证、完全负担得起Cells-to-CT™ 一步法 Power SYBR™ Green 试剂盒的所有组分均经过优化,具有一致且可靠的性能。这样可以消除不同样品制备和实时一步法 RT-PCR 预混液组装过程中的猜测。
为了进一步保证质量,Cells-to-CT™ 一步法 Power SYBR™ Green 试剂盒已通过一套用于常见基因靶标的引物进行了验证,其性能与通过纯化 RNA 获得的性能相当。
所有这些优势加在一起,让 Cells-to-CT™ 一步法 Power SYBR™ Green 试剂盒成为了您的基因表达实验的超值之选。由于有足够试剂为每份样品进行5次实时 RT-PCR,与单独购买预混液和 RNA 纯化试剂盒进行相同工作相比,可节省大量时间和费用。
附属产品SYBR™ Green Cells-to-CT™ 对照试剂盒设计与 SYBR™ Green Cells-to-CT™ 产物配合使用。该试剂盒包含一个内源性对照引物对 (ACTB),用于对样品装载可变性进行标准化,以及一个人工 XenoRNA™ 对照和相应的引物对,以监测 PCR 抑制的效果。