化学交联结合质谱分析是改善蛋白质表征和鉴别蛋白-蛋白相互作用的有效方法。该方法已应用于重组和天然蛋白复合物,并且最近已应用于全细胞裂解物或完整的单细胞生物,以在全局规模内鉴别蛋白-蛋白相互作用。DSSO 和 DSBU 中可切割性的较近增强提高了 MS 兼容性以及检测交联肽和蛋白质的灵敏度。
• 高度反应性 NHS 酯(两端)与伯胺
• 可通过碰撞诱导解离 (CID) 进行 MS 切割
• 高纯度结晶试剂,用于蛋白质结构和相互作用表征
• 半透膜,可用于细胞内交联
• 不溶于水(首先溶于 DMF 或 DMSO)
DSSO(双琥珀酰亚胺亚砜)和 DSBU(二琥珀酰亚胺二丁基脲)(或 BuUrBU)是 MS 可切割和半透膜交联剂,在 7 碳原子间隔臂 (DSSO) 或 11 原子间隔臂 (DSBU) 的每个末端均含有一个胺反应性 N-羟基琥珀酰亚胺 (NHS) 酯。两种交联剂与 DSS 具有相似的反应性,但在连接区具有可切割功能,在串联 MS(MS/MS) 片段化期间,可使用碰撞诱导解离 (CID) 在气相中进行切割。DSSO 或 DSBU 的 MS 切割在 MS2 期间生成诊断离子双联体,能够鉴定来自死端修饰的交联肽。随后,使用 MeroX 或 XlinkX 软件鉴定交联肽片段。对于 DSSO,MS/MS 期间切割交联肽的能力使得可使用 MS3 采集方法,通过传统数据库搜索引擎促进肽测序。
备注:要对交联肽进行高分辨率分析,推荐用于 Nanospray Flex 源的 LC 色谱柱是 Acclaim PepMap 100 C18 LC 色谱柱(货号 164940 或 164568)。对于 EASY-Spray 离子源,推荐 LC 色谱柱为 EASY-Spray C18 LC 色谱柱(货号 ES900 或 ES904)。
For Research Use Only. Not for use in diagnostic procedures.