SureQuant™ AKT 通路相对定量模块

SureQuant 定量模块包含来自10种 AKT-mTOR 信号通路靶蛋白的30种独特肽，用于通过 LC 和 MS 对独特多肽进行多通路定量。SureQuant 试剂盒将多通路免疫沉淀与质谱分析结合使用，以同时富集和定量测定 AKT/mTOR 信号通路中的靶蛋白。每个多通路检测组合包含两个模块：1) IP 和 MS 样本制备模块，包括免疫富集靶蛋白以及后续溶液内 MS 样本制备所需的所有试剂，以及 2) 一个绝对或相对定量模块，包括系统适用性标准品以及 HeavyPeptide™ 和 LightPeptide™ AQUA Ultimate 混合物。

对于相对定量，提供了 HeavyPeptide AQUA Ultimate 混合物，用作多通路样本中的加标内标。对于绝对定量，提供了 HeavyPeptide 和 LightPeptide AQUA Ultimate 混合物，以及 Pierce™ 6 蛋白消化物，用于在基质中生成标准曲线。两个模块均含有 Pierce™ LC-MS/MS 系统适用性标准品（7 x 5 混合），以便在运行校准曲线和样本前评估 LC-MS/MS 系统的动态范围。

IP 和 MS 样本制备模块可实现高效的抗原 IP 和 co-IP，从而进行 MS 分析。首先裂解细胞，并与经 IP–MS 验证的生物素化抗体混合物一起孵育。然后将抗体–抗原复合物捕获到与 MS 兼容的链霉亲和素磁珠上，并用与 MS 兼容的缓冲液洗涤，以去除非特异性蛋白。靶蛋白可使用胰蛋白酶洗脱，且与 MS 样本制备流程兼容。MS 样本制备流程已简化，在4小时内即可完成，以便样本可以在当天进行 MS 分析。

AKT/mTOR 信号通路是细胞生长和增殖的主要调控通路，在信号级联中发挥了重要作用。该通路的异常激活可促进多种癌症中肿瘤细胞的存活。SureQuant 试剂盒适用于在单次测定中监测 AKT/mTOR 表达水平、同种型和磷酸化状态。在一份样本中同时监测和定量的能力是评估正常和异常细胞生长的强大工具。

SureQuant AKT 信号通路多通路检测组合的特点：
• 完整—包括成功监测 MS 系统性能、样本制备以及靶蛋白和多肽定量所需的所有试剂
• 经过验证—抗体、多肽和对照裂解物均经过严格测试，可确保特异性及成功定量测定每种靶肽
• 多通路—能够定量测定 AKT/mTOR 通路中的不同靶标、RAS 和 p53 同种型
• 灵活—模块化形式允许单独进行免疫富集，或与相对或绝对定量结合使用