FirstChoice™ RLM-RACE 试剂盒

FirstChoice™ RLM-RACE 试剂盒设计用于仅从全长、加帽 mRNA 扩增 cDNA，通常在 PCR 后生成单个条带。该试剂盒是基本 cDNA 末端快速扩增 (RACE) 方案的重大改进。RLM-RACE 程序仅选择全长 mRNA（非 rRNA、tRNA 或降解 RNA），并有助于从信息的 5' 端克隆序列。

FirstChoice™ RLM-RACE 试剂盒的特点：

•在一天内从 RNA 获得 PCR 产物
•可以从稀有转录本中获得单个特异性产物
•选择真信息的 5' 和/或 3' 端
•高效 — 对所有酶促反应进行优化，以确保检测到极少的 mRNA

RACE
cDNA 末端快速扩增 (5'-RACE) 是基于聚合酶链反应的技术，该技术有助于从信息的 5' 端克隆序列。FirstChoice™ RLM-RACE 试剂盒是基本 RACE 方案的重大改进。

选择全长 mRNA（非 rRNA、tRNA 或降解 RNA）
在 FirstChoice™ RLM-RACE 程序中，通过使用小牛肠道磷酸酶 (CIP) 处理总 RNA 或多聚腺苷酸 RNA 去除含游离 5'-磷酸盐的所有分子（核糖体 RNA、片段 mRNA、tRNA 和污染基因组 DNA）中的 5'-磷酸盐从而选择全长 mRNA。全长 mRNA 不受影响。然后用烟草酸焦磷酸酶 (TAP) 处理 RNA，以去除全长 mRNA 中的帽结构，留下 5'-单磷酸。一个合成 RNA 接头连接至 RNA 群（仅含有 5'-磷酸盐的分子），未加帽的全长 mRNA 将接受接头。然后，进行随机引物标记、逆转录反应和巢式 PCR 以扩增特定转录本的 5' 端。

在一天内从 RNA 获得 PCR 产物
FirstChoice™ RLM-RACE 程序的每个步骤均已优化，这样您可以在不到5小时内完成所有酶促反应，甚至开始 PCR。FirstChoice™ RLM-RACE 试剂盒不仅包含生产 5 RLM-RACE 即用型 cDNA 制剂的试剂和酶，还包含用于100次 PCR 反应的引物和巢式 RACE 接头。还包括逆转录试剂。每个试剂盒都包含用于测试试剂盒性能的对照 RNA 和引物以及详细的说明手册。SuperTaq™ Thermostable Taq DNA 聚合酶可单独购买。为了极佳地扩增 ≥1 kb 片段，请使用 SuperTaq-Plus。还包括用于 3' RACE 的 3' RACE 接头和引物。