PARIS™ 试剂盒

Ambion™ PARIS™ 系统用于从同一实验样品中分离 RNA 和天然蛋白质。该试剂盒还可在 RNA 和/或蛋白质分离前分离细胞核和细胞质组分。该试剂盒含有足够用于从 1 至 75 mg 组织或 100 至 10⁷ 个细胞中各进行 50 次纯化的试剂。

•快速、简单的程序
• 从培养的细胞中分离细胞核和细胞质 RNA 和蛋白质
• 从培养的细胞或组织中分离总 RNA 和蛋白质
• 无需苯酚提取或酒精沉淀
• 减少独立实验样品之间的时间、成本和差异

分离高质量 RNA 是各种基因表达分析的第一步。通常，还需要在蛋白质水平进行互补性研究。通常，这些分析使用相同的实验样品等份试液进行。然而，当处理罕见、难以获得或非常小的样品时，有时无法独立分离 RNA 和天然蛋白质。在涉及大量样品、昂贵试剂或固有变异性（如细胞转染）的研究中，添加独立实验样品不仅要耗费大量成本和时间，而且可能导致结果不一致。为解决这些问题，我们开发了蛋白质和 RNA 分离系统（PARIS™ 系统）。它可从同一个实验样品中同时分离 RNA 和蛋白质（参见图）。使用 PARIS™ 系统，可从全细胞裂解物中同时分离 RNA 和蛋白质。或者，可以从单独的细胞核和细胞质组分中分离出 RNA 和蛋白质。首先将组织或培养的细胞在冷的细胞破坏缓冲液中混匀，以制备总细胞裂解物。由于在冰上和存在去污剂的条件下均可快速进行均质化，因此可以直接从这一裂解物中纯化蛋白质和 RNA。对于 RNA 分离，部分总细胞裂解物可立即与等体积的裂解/结合溶液混合。然后使用 RNA 结合玻璃纤维过滤柱从混合物中纯化总 RNA。三个快速洗涤步骤后，以浓缩形式洗脱高质量 RNA。可在不到 20 分钟的时间内完成整个程序。备注：不建议将本试剂盒用于核糖核酸酶含量高的组织（如胰腺）。

其与大多数下游应用兼容
使用 PARIS™ 程序分离自总、细胞核或细胞质组分的 RNA 可用于多种下游应用，包括印迹杂交、体外翻译、cDNA 合成和 RT-PCR。建议将 DNase I 处理用于 RT-PCR 实验（参见辅助产品）的 RNA。蛋白组分可直接用于大多数常见应用，包括功能测定、免疫沉淀、Western 印迹或二维凝胶电泳（如图所示）。

辅助产品：
TURBO™ DNA-free™ 或无 DNA-free™ DNase 处理和去除试剂（分别为 SKU #AM1907 和 AM1906）是从总 RNA 样品和细胞核 RNA 样品中快速去除痕量数量 DNA 的理想选择，无需苯酚提取或酒精沉淀。细胞质 RNA 组分几乎不含 DNA 污染。