Ambion DNase I(无 RNase)(E.C.3.1.21.1) 是一种非特异性核酸内切酶,能够降解双链和单链 DNA 及染色质。它通过水解磷酸二酯键产生具有 5'-磷酸基和 3'-羟基的单核苷酸和寡核苷酸发挥作用。无 RNase 的 DNase I 是现有酶中纯度较高的种类,建议在不含 RNase 的情况下降解 DNA,无 RNase 对于保持 RNA 的完整性至关重要。例如,DNase I 常用于体外转录后去除模板 DNA,以及去除总 RNA 制备物中的 DNA 污染(特别是源自那些可能含有质粒 DNA 的转染细胞的 DNA 污染),可用于核糖核酸酶保护试验、cDNA 文库收缩以及 RT-PCR。为了达到最大活性,DNase I 需要二价阳离子(Mg2+ 和 Ca2+,分别约为 5 mM 和 0.5 mM),且最佳 pH 值为 7.8。
DNase I(不含 RNase)优于竞争对手
援引自 BioTechniques 的一篇研究报告 (Matthews et al., 32: 1412-1417, 2002) 比较了来自 Sigma、Roche、Applied Science、Qiagen 和 Ambion 的 DNase I 剂中的 RNase 污染。结果表明:“除了 Ambion™ 的无 RNase DNase I 外,体外转录反应的 cRNA 完整性均受损,且仍受到了 DNA 污染。Ambion™ 的 DNase 用于其余需要 DNase 酶切的实验…”。已对 Ambion™ DNase I 进行了 RNase 污染和蛋白酶活性的测试。对人基因组 DNA 进行酶切,然后对未酶切的 DNA 进行定量实时 PCR 检测,以确定功能性。
单位定义
一单位是指在 10 min 内于 37°C 下完全降解 1 µg DNA 所需的酶量,相当于 0.04 Kunitz 单位。
辅助产品
如需要牛 DNase I 的替代品,请考虑重组 DNase I(货号 AM2235)。对于活性更高、耐盐的 DNase,请参阅 TURBO™ DNase 产品(货号 AM2239 和 AM2238)。
仅供科研使用。不可用于诊断程序。