Ambion™ RNase 抑制剂、克隆、40 U/μL

Ambion™ RNase 抑制剂（在大肠杆菌中生产的重组人蛋白）是中性胰腺 RNase A 型酶的一种强效抑制剂。抑制模式具有非竞争性；抑制剂以 1:1 的比例紧密结合 RNase。以含 10,000 U (40 U/ µL) 酶的单管形式提供。该酶已证明能够使多种组织和细胞类型中存在的 RNase 失活。通过逆转录制备 cDNA、体外 RNA 转录以及体外蛋白合成时必须维持 RNA 的完整性，已证明此过程中添加核糖核酸酶抑制剂 (RI) 是有用的。RI 不抑制 RNase I、T1、T2、H、U1、U2 或 CL3。RI 至少需要 1 mM DTT 以维持活性，在 pH 值5.0至8.0之间具有活性，在 pH 值7.0至8.0之间具有最大活性。由于抑制模式是与 RNase 形成 1:1 的复合物，必须小心避免核糖核酸酶抑制剂的变性或氧化（例如通过添加 SDS、尿素等）。RI 应添加至转录、翻译和 cDNA 合成反应中，最终浓度为 1 U/µL。RNase 抑制剂在污染 RNase、核酸外切酶、核酸内切酶和蛋白酶活性方面经过严格检测。

单位定义：
一个单位是抑制 5 ng RNase A 50% 活性所需的蛋白量。单位测定条件：100 mM Tris 醋酸盐（pH 值为6.5）、1 mM EDTA、1 mM 环 2',3'-CMP 和 RNase 抑制剂。添加 RNase A 启动反应。通过对 RNase A 水解环 2', 3'-CMP 的抑制来测定 RNase 抑制剂活性。