Click-iT™ HPG Alexa Fluor™ 488蛋白合成检测试剂盒

Click-iT™ HPG Alexa Fluor™ 488 蛋白合成测定试剂盒提供了一种快速、灵敏、无毒的非放射性方法，采用荧光显微镜、高含量成像或流式细胞分析检测初生蛋白合成。试剂盒包含 L-高炔丙基甘氨酸（HPG，蛋氨酸的氨基酸类似物，含有炔基）和 Alexa Fluor™ 488 叠氮化物。用 HPG 饲喂培养细胞，在活性蛋白合成过程中掺入蛋白中。添加 Alexa Fluor™ 488 叠氮化物致使绿色荧光叠氮化物与炔基发生化学选择性连接或“点击”反应，从而通过成像分析检测修饰蛋白。

•非放射性替代品 — 传统 ³⁵S-蛋氨酸的替代品
• 可观察大量蛋白动态 — 蛋白的荧光标记可以确定它们的定位，包括聚集情况
• 特异性 — 标记与检测标签之间的选择性、特异性反应
• 稳定性 — 产物含有不可逆的共价键
• 具有多重检测功能 — 可与 Click™-iT AHA（叠氮化氨基酸和炔烃染料）结合使用，检测时空差异
• 生物样品适用性 — 无论复杂程度如何，检测简单、灵敏度高且背景低

已成功地在 HeLa、A549 和 U-2 OS 细胞中用多种抑制蛋白合成的试剂（包括放线菌酮和茴香霉素）对 Click-iT™ HPG Alexa Fluor™ 488 蛋白合成测定试剂盒进行了测试。HeLa 细胞中蛋白酶体抑制剂（MG132 和 Bortezomib）和自噬阻滞剂（氯喹）的应用也体现了这些探针监测蛋白降解的适用性。

另外，Click-iT™ HPG Alexa Fluor™ 488 蛋白合成测定试剂盒与 Click™-iT AHA 和 Alexa Fluor™ 594 炔烃之间存在 Click-iT™ 化学差异，因此这些试剂可结合用于测定初生蛋白合成的空间或时间差异。