使用用于进行原位细胞凋亡检测的 Click-iT Plus TUNEL 检测试剂盒检测组织和培养细胞样品中的更多凋亡细胞,该方法提供 Alexa Fluor 488、594 和 647 荧光染料选项。该原位细胞凋亡检测试剂盒针对组织或细胞样品进行了优化,染料可与其他染料或蛋白(如 GFP 和 RFP)一起进行多通路检测,并且因其尺寸较小(与抗体相比),因此更容易掺入复杂分子中。该 TUNEL 检测试剂盒也非常灵活,可用于在一次实验中检测 1–50 份样品。
用于原位细胞凋亡检测的 Click-iT Plus TUNEL Alexa Fluor 488、594 和 647 检测试剂盒可通过掺入较小的高度特异性标记部分和较亮荧光染料来检测组织和培养细胞样品中的凋亡细胞。将标记部分掺入 DNA 片段后,通过催化“点击”反应实现检测,所用条件足够温和,可保留 GFP 或 RFP 的荧光信号。
用于原位细胞凋亡检测的 Click-iT Plus TUNEL 检测试剂盒的其他优势包括:
• 经过优化,可检测组织或细胞样品中的凋亡细胞
• 支持多通道检测—经过优化,可与荧光染料或蛋白(如 GFP 和 RFP)配合使用
• 经改良的 TUNEL 检测—由于有较小的反应部分,可更好地掺入标记
• 明亮的凋亡信号—使用 Alexa Fluor 染料可产生稳定的非光漂白的荧光信号
• 灵活性—该检测试剂盒可配置为一次检测 1–50 份样品
细胞 DNA 片段化是细胞凋亡的标志。TUNEL 检测是检测组织样品中凋亡细胞 DNA 片段的较常用方法。TUNEL 检测首先在 DNA 片段的 3’-OH 末端掺入修饰后的 dUTP。dUTP 修饰通常是加入一个荧光基团。由于荧光基团大小不一,修饰后的 dUTP 的掺入率低于预期结合率,对 TUNEL 检测的灵敏度产生影响。此外,目前可用的 TUNEL 检测试剂盒中使用的多种荧光基团会出现光漂白和荧光光谱重叠问题,这两种问题都会降低该检测的灵敏度和多通路检测能力。
Click-iT Plus TUNEL 检测试剂盒专为解决这些问题而开发。该检测试剂盒使用经炔烃基团(一种小的生物正交官能团)修饰的 dUTP,可使核苷酸更容易掺入。掺入后,在炔烃基团与 Alexa Fluor 吡啶甲基叠氮化物荧光染料之间产生高特异性点击反应,随后对该染料进行检测,这是一种用于检测凋亡细胞或组织样品的灵敏且具特异性的检测。由于 Click-iT Plus TUNEL 检测试剂盒的反应条件较为温和,该检测也可与荧光蛋白或染料一起进行多通路检测。
已使用几种不同的福尔马林固定石蜡包埋组织类型对 Click-iT Plus TUNEL 检测试剂盒进行了验证。在所有情况下,均保留了荧光蛋白和染料的多通路检测性能。此外,还保留了使用荧光标记的鬼笔环肽对肌动蛋白进行染色的能力。
Click-iT Plus TUNEL 检测试剂盒包含检测组织或细胞样品中的凋亡细胞所需的所有试剂。本试剂盒中提供的试剂可用于检测 50 份样品,并且经过配置一次可检测 1–50 份样品。
For Research Use Only. Not for use in diagnostic procedures.