Click-iT™ EdU 比色 IHC(免疫组织化学技术)检测试剂盒是优于传统方法的替代方法,用于组织切片中增殖细胞比色检测。在该检测中,将 5-乙炔基-2'-脱氧尿苷 (EdU)(含炔烃部分的胸苷核苷类似物)掺入新合成的 DNA 中。当添加含有叠氮基团的生物素时,短暂的点击反应会将叠氮化物连接到 EdU 分子上的炔烃部分。添加链霉素亲和素–过氧化物酶和过氧化物酶底物后,酶促反应产生信号,可通过光学显微镜检查并储存以供将来分析。
了解更多增殖细胞成像检测工具 >• 优化—可进行组织或细胞样品中增殖细胞的比色检测
• 高效—无需变性步骤或严苛处理
• 稳健—更好的维持细胞形态和细胞环境可提供丰富的检测结果
• 一致—不依赖于可变抗体批次进行检测
• 简单—设计为在比传统方法更短的时间内持续工作
传统方法获得不一致的结果测量细胞增殖变化是评估细胞健康、确定遗传毒性和评估抗癌药物研究的基本方法。
较准确的方法是直接检测 DNA 的合成。传统方法利用核苷类似物 5-溴-2'-脱氧尿苷(BrdU;一种胸腺嘧啶核苷的核苷类似物)掺入新转录的 DNA 中。样品掺入后用严格的方法处理(HCl、加热或酶)使 DNA 变性并将 BrdU 分子暴露于抗 BrdU 抗体进行检测。这些严苛的处理可能会对样品完整性、细胞形态和图像质量产生不利影响。此外,生产差异性、非特异性结合和交叉反应性问题可能导致结果不一致。
相较于其他检测的优势相较于 BrdU 检测等传统方法,Click-iT EdU 比色免疫组织化学技术检测试剂盒可提供许多优势。使用小尺寸生物素-叠氮化物部分,可使用温和条件有效检测掺入的 EdU。相比之下,BrdU 检测需要使用 HCl 和/或热诱导抗原决定簇修复 (HIER) 的严苛变性方法。此外,与依赖于有时表现出非特异性结合的抗体的 BrdU 检测不同,Click-iT EdU 比色免疫组织化学技术检测试剂盒使用生物正交(生物唯一)部分—可获得低背景信号、高检测灵敏度且无交叉反应性问题。
该试剂盒含有检测福尔马林固定石蜡包埋 (FFPE) 组织样品中存在的掺入 EdU 所需的所有组分。该试剂盒包括足以标记五十 (50) 片 18 x 18 mm 盖玻片的试剂(每次检测使用 100 μL 反应试剂)。