EZ-Link 马来酰亚胺-PEG4-DBCO 是一种巯基反应性异型双功能交联剂，其包含二苄基环辛炔 (DBCO) 基团，用于无铜点击化学应用。硫醇/巯基反应性马来酰亚胺可用于标记多种含硫醇部分，如蛋白、肽或其他（生物）分子中的游离胱氨酸。一旦蛋白或（生物）分子被 DBCO 标记，其即会发生无铜叠氮化物-炔烃环加成反应，与叠氮化物标记的偶联配偶体形成稳定的三唑键。

EZ-Link 马来酰亚胺-PEG4-DBCO 的特点包括：
• 生物正交 — DBCO 和叠氮化物有选择地反应形成三唑键
• 硫醇反应性 — 可与巯基 (-SH)（如半胱氨酸 (C) 侧链）发生反应
• 异型双功能 — 可与巯基和叠氮化物发生反应
• 可溶性 — 试剂易溶于水溶性溶剂，以稀释至水性反应混合物

EZ-Link 马来酰亚胺-PEG4-DBCO 可用于通过炔烃和叠氮化物（单独提供）之间的生物正交偶联产生不同的偶联物。偶联或交联方法通常分两步完成。首先，用 DBCO 基团标记含蛋白或硫醇的分子，并除去过量的交联剂。其次，将含叠氮化物的部分（独立制备）引入与 DBCO 部分相同的系统中，并在生物条件下进行标记，而无需引入任何额外试剂，如铜催化剂。

经典的点击反应包括铜催化的叠氮化物-炔烃环加成，以标记或偶联分子。­这种方法的缺点是铜离子会损害蛋白功能，损害细胞，并减少荧光基团的荧光。DBCO 的独特之处在于它不需要铜来催化与叠氮化物的反应以形成三唑。八元环形式的菌株允许在没有催化剂的情况下与叠氮化物修饰的分子发生反应，从而防止铜诱导的对细胞或蛋白的损伤。