EZ-Link 生物素-PEG12-DBCO 是一种生物素化试剂,含有一个二苄基环辛炔 (DBCO) 基团,用于无铜点击化学连接到叠氮化物标记分子,能够使用生物正交方法连接生物素。DBCO 基团通过无铜菌株促进的叠氮化物-炔烃环加成 (SPAAC) 反应优先与叠氮化物反应,以与叠氮化物标记的偶联配偶体形成稳定的三唑键。EZ-Link 生物素-PEG12-DBCO 含有一个 12 单位聚乙二醇间隔臂,用于增加水溶性和范围。
EZ-Link 生物素-PEG12-DBCO 特点包括:
•生物正交—DBCO 和叠氮化物有选择地反应形成三唑键
• 增强溶解度—聚乙二醇化使生物素化分子具有水溶性,有助于防止储存在溶液中的生物素化抗体的聚集
• 不可逆—形成不可逆且稳定的三唑键
经典的点击反应包括铜催化的叠氮化物-炔烃环加成,以标记或偶联分子。这种方法的缺点是铜离子会损害蛋白功能,损害细胞,并减少荧光基团的荧光。DBCO 的独特之处在于它不需要铜来催化与叠氮化物的反应以形成三唑。八元环形式的菌株允许在没有催化剂的情况下与叠氮化物修饰的分子发生反应,从而防止铜诱导的对细胞或蛋白的损伤。