Thermo Scientific™ T4 多聚核苷酸激酶 (T4 PNK) 催化 γ-磷酸盐从 ATP 转移至单链和双链 DNA 和 RNA、寡核苷酸或核苷 3'-单磷酸盐的 5'-OH 基团(正向反应)。此反应可逆。在存在 ADP 的情况下,T4 多聚核苷酸激酶表现出 5'-磷酸酶活性并催化 5'-P-寡核苷酸-多核苷酸和 ATP 之间磷酸基的交换(交换反应)。该酶也是一种 3'-磷酸酶。
产品优势• 在 Thermo Scientific 限制性内切酶、RT 和
T4 DNA 连接酶缓冲液中均有活性
应用• 标记核酸的 5'-末端,用作以下物质:
--用于杂交的探针
--用于转录本映射的探针
--用于凝胶电泳的标志物
--用于 DNA 测序的引物
--用于 PCR 的引物
• 连接前寡核苷酸、PCR 产物、其他 DNA 或 RNA 的 5'-磷酸化
• PCR 引物的磷酸化
• 通过 [
32P]-标记后试验进行的 DNA 修饰检测
• 去除 3'-磷酸基
注• 可通过正向反应或交换反应标记核酸的 5'-末端。
• 聚乙二醇 (PEG) 和亚精胺改善磷酸化反应的速率和效率。PEG 用于交换反应混合物。
•由于 T4 多聚核苷酸激酶受到铵离子抑制,在磷酸化之前请使用醋酸钠来沉淀 DNA。