5' | | | ↓ | N7 | G | A | A | C | N6 | T | C | C | N12-13 | ↓ | | 3' |
3‘ | | | ↑ | N12-13 | C | T | T | G | N6 | A | G | G | N7 | ↑ | | 5' |
Thermo Scientific AloI 限制性内切酶可识别 ^(7/12-13)GAAC(N)6TCC(12-13/7)^ 位点,并于 30°C在 R 缓冲液中的切割效果最佳。有关本限制性内切酶及其他限制性内切酶的酶活性、双酶切条件和热灭活的表格,请参见
限制性内切酶的反应条件。
Thermo Scientific 常规限制性核酸内切酶是高质量限制性内切酶的大量汇集物,经过优化以便在五缓冲液系统的一种缓冲液中发挥作用。此外还提供通用 Tango 缓冲液,便于进行双酶切。所有酶在推荐的缓冲液和反应条件下均表现出 100% 活性。为确保一致的性能,Thermo Scientific 限制性内切酶反应缓冲液包含预混合 BSA,其可增强多种酶的稳定性,并与 DNA 制剂中可能存在的污染物相结合。
特点•卓越的质量—严格的质量控制和行业领先的生产工艺
•便利的颜色编码的五缓冲液系统
•包括用于双酶切的通用型 Tango 缓冲液
•在反应缓冲液中预混合 BSA
•多种限制性核酸内切酶特异性可供选择
应用•分子克隆
•限制位点作图
•基因分型
•Southern 印迹
•限制性片段长度多态性 (RFLP)
•SNP
备注:有关甲基化敏感性,请参阅产品规格。37°C 下孵育时具有 20% 活性。AloI 可在识别位点的两侧切断双链 DNA,形成双链切口。它的独特之处在于可以在识别序列的3末端(第12或13个核苷酸处)生成一个兼并酶切点。在反应混合物中添加 SAM 会导致 AloI 酶切不完全。超过10倍的 AloI 过量酶切可能会导致星号活性。AloI 可能会与已切断的 DNA 结合在一起。这会导致电泳中出现 DNA 条带漂移。为避免非典型 DNA 带型,使用 6X DNA 上样染料与 SDS 溶液进行样品制备,或在电泳前在存在 SDS 的条件下加热酶切的 DNA。