5' | | | G | G | C | C | N | N | N | N ↓ | N | G | G | C | C | | 3‘ | |
3‘ | | | C | C | G | G | N ↑ | N | N | N | N | C | C | G | G | | 5' | |
Thermo Scientific SfiI 限制性内切酶可识别 GGCCNNNN^NGGCC 位点,并于 50°C下在 G 缓冲液中的切割效果最佳。有关该酶和其他限制性内切酶的酶活性、双重酶切条件和热灭活的表格,请参见
限制性内切酶的反应条件。备注:另外提供用于快速 DNA 酶切的
FastDigest 酶。
Thermo Scientific 常规限制性核酸内切酶是高质量限制性内切酶的大量汇集物,经过优化以便在五缓冲液系统的一种缓冲液中发挥作用。此外还提供通用 Tango 缓冲液,便于进行双酶切。所有酶在推荐的缓冲液和反应条件下均表现出 100% 活性。为确保一致的性能,Thermo Scientific 限制性内切酶反应缓冲液包含预混合 BSA,其可增强多种酶的稳定性,并与 DNA 制剂中可能存在的污染物相结合。
特点•卓越的质量—严格的质量控制和行业领先的生产工艺
•便利的颜色编码的五缓冲液系统
•包括用于双酶切的通用型 Tango 缓冲液
•在反应缓冲液中预混合 BSA
•多种限制性核酸内切酶特异性可供选择
应用•分子克隆
•限制位点作图
•基因分型
•Southern 印迹
•限制性片段长度多态性 (RFLP)
•SNP
备注:酶活性检测采用的是带插入片段的 pUC19 DNA,此片段含有两个源自腺病毒-2 DNA 的 SfiI 位点。37°C 下孵育时具有 10% 活性。重叠的 dcm 甲基化会导致 SfiI 酶切作用下降。为避免 dcm 甲基化,请使用 dam-、dcm 菌株,如 GM2163。使用 SfiI 进行酶切时,需要其识别序列的至少两个拷贝。这两个位点可位于同一个或不同的 DNA 分子上。(L. M. Wertzell 等人、J. Mol.Biol、248、581-595、1995。)因此,还可补充一段含有 SfiI 识别位点的寡核苷酸。有关甲基化敏感性,请参阅产品规格。