5' | | | ↓ | C | C | W | G | G | | 3‘ |
3‘ | | | G | G | W | C | C ↑ | | 5' |
Thermo Scientific EcoRII 限制性内切酶可识别 ^CCWGG 位点,并在 37°C 下的 O 缓冲液中的切割效果最佳。有关该酶和其他限制性内切酶的酶活性、双重酶切条件和热灭活的表格,请参见
限制性内切酶的反应条件。同裂酶:AjnI、BseBI、Bst2UI、BstNI、BstOI、Psp6I、PspGI。
Thermo Scientific 常规限制性核酸内切酶是高质量限制性内切酶的大量汇集物,经优化可在五缓冲液系统的一种缓冲液中发挥作用。此外还提供通用 Tango 缓冲液,便于进行双酶切。所有酶在推荐的缓冲液和反应条件下均表现出 100% 活性。为确保一致的性能,Thermo Scientific 限制性内切酶反应缓冲液包含预混合 BSA,其可增强多种酶的稳定性,并与送入 DNA 制剂中的污染物相结合。
特点• 卓越的质量—严格的质量控制和行业领先的生产工艺
• 便利的颜色编码的五缓冲液系统
• 包括用于双酶切的通用型 Tango 缓冲液
• 在反应缓冲液中预混合 BSA
• 多种限制性核酸内切酶特异性可供选择
应用• 分子克隆
• 限制位点作图
• 基因分型
• Southern 印迹
• 限制性片段长度多态性 (RFLP)
• SNP
备注:为实现有效切割,至少需要复制两个EcoRII 识别位点。要切割仅有识别位点 MvaI 的一个复制的 DNA 底物,建议使用的 EcoRII 异裂酶。EcoRII 可能会与已切断的 DNA 结合在一起。这会导致电泳中出现 DNA 条带漂移。为避免出现不典型的 DNA 电泳带型,请使用 6X DNA 上样染料及 SDS 溶液制备样品,或者在电泳前将 SDS 加入 DNA 酶切产物中并进行加热。酶活性检测采用的是 pBR322 DNA (dcm-)。重叠的 dcm 甲基化会导致 EcoRII 的酶切作用被阻断。为避免 dcm 甲基化,使用 dam-、dcm-菌株,如 GM2163。有关甲基化敏感性的信息,请参阅产品规格。