Zero Blunt™ PCR 克隆试剂盒

Zero Blunt™ PCR 克隆试剂盒提供了一种简单的方法，可高效 (>80%) 克隆使用校正读码耐热 DNA 聚合酶扩增的平末端 PCR 产物。Zero Blunt™ PCR 克隆试剂盒使用多用途 pCR™-Blunt 克隆载体和 ExpressLink™ T4 DNA 连接酶，在五分钟室温连接步骤中生成一个连接产物。

含 pCR™-Blunt 载体的 Zero Blunt™ 克隆™试剂盒的特点：
•快速便捷—5分钟室温连接
• 高效—用于阳性选择的 ccdB 基因可产生 >80% 的具有正确插入片段的克隆
• 灵活—可选择卡那霉素或 Zeocin™ 抗性，实现灵活的抗生素选择

pCR™-Blunt 载体提供：
•位于 PCR 产物插入位点侧翼的 EcoR I 位点，可切除插入片段
• T7 启动子/引物位点，用于体外 RNA 转录和测序
• 用于测序或 PCR 筛选的 M13 正向和反向引物位点

Zero Blunt™ PCR 克隆如何工作
Zero Blunt™ PCR 克隆试剂盒设计用于在非重组的低背景下克隆平末端 PCR 片段（或任何平末端 DNA 片段）。pCR™-Blunt 载体含有与 LacZα 的 C 端融合的致死性大肠杆菌 ccdB 基因（Bernard 等人，1994）。连接平末端 PCR 片段可破坏 lacZα-ccdB 基因融合的表达，从而在转化时仅允许阳性重组体生长。当对转化混合物进行平板接种时，杀死含有非重组载体的细胞。

试剂盒配置
Zero Blunt™ PCR 克隆试剂盒有多种配置可供选择：含 One Shot™ TOPO10 化学感受态大肠杆菌（K2700-20 和 K2700-40）以及不含感受态细胞（K2750-20 和 K2750-40），有 20 次和 40 次反应试剂盒规格。