BLOCK-iT™ U6 RNAi 入门载体试剂盒
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BLOCK-iT™ U6 RNAi 入门载体试剂盒

该 BLOCK-iT™ U6 RNAi 入门载体提供了用于克隆短发夹 RNA (shRNA) 序列的简单的简化方法,以便检测瞬时转染中的 RNA 干扰了解更多信息
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货号 K494500
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该 BLOCK-iT™ U6 RNAi 入门载体提供了用于克隆短发夹 RNA (shRNA) 序列的简单的简化方法,以便检测瞬时转染中的 RNA 干扰 (RNAi),是分析基因下调调节的首选技术。简单的克隆方法会在启动 U6 pol III 型启动子之后立即启动 ∼50-bp 寡核苷酸 DNA 的反应(图1)。该 RNAi 盒的表达在细胞中形成 shRNA 分子,其将经过加工并作为会产生 RNAi 效应的短干扰 RNA (siRNA)。

交付 U6 RNAi 盒
完成克隆后,U6 入门载体可立即用于使用 Lipofectamine™ 2000 等试剂进行的瞬时转染。这使得该系统适用于在许多哺乳动物细胞类型中进行初始 shRNA 筛选。作为难转染或非分裂细胞类型的替代物或传递到动物模型系统的替代物,RNAi 组织盒可以轻松地重组到 BLOCK-iT™ 病毒 RNAi 载体中。为获得稳定的 shRNA 慢病毒递送和表达,将 BLOCK-iT™ U6 入门载体与 pLenti6/BLOCK-iT™ RNAi 载体重组。若要瞬时传递至挑战细胞类型(使用腺病毒转导),请将 pAd/BLOCK-iT™ RNAi 载体重组。
仅供科研使用。不可用于诊断程序。
规格
产品类型RNAi 入门载体试剂盒
克隆方法Gateway™
构成或诱导系统组成型
输送类型转染
RNAi 类型shRNA
载体BLOCK-iT RNAi 载体
促进剂U6
产品规格试剂盒
产品线BLOCK-iT™
数量20次构建
Unit SizeEach
内容与储存
BLOCK-iT™ U6 入门载体试剂盒含有两个盒。克隆盒含有四管线性化载体(5 ng/管),每管中的载体量均足以完成 5 次克隆反应。还包括 250 µl 10X 退火缓冲液、20 µl T4 DNA 连接酶、80 µl 5X DNA 连接酶缓冲液、1.4 ng lacZ 对照寡核苷酸、10 µl 冻干 lacZ 对照质粒、1.5 mL 无 DNase/RNase 水以及各 2 µg 正向和反向测序引物。将载体、缓冲液、对照寡核苷酸和质粒、水和测序引物储存在 -20°C 下。One Shot™ 盒含有转化试剂,包括 21 份 50 µL One Shot™ TOP10 化学感受态大肠杆菌、S.O.C. 培养基和 pUC19 超螺旋对照质粒的等份试液。在 -80°C 下储存。妥善储存时,所有试剂均可保证稳定储存 6 个月。