BACE1（β-分泌酶）FRET 检测试剂盒，红色

BACE1（β-分泌酶）是一种关键酶，它参与了在阿尔茨海默病 (AD) 的细胞外淀粉样蛋白斑块中发现的淀粉样蛋白 β-肽 (Abeta) 的生成。在某些情况下，早发性家族性 AD 可归因于淀粉样蛋白前体蛋白 (APP) 的“瑞典”突变，该突变通过 BACE1 显著增强该蛋白的切割。这和其他遗传以及病理学证据形成了专注于抑制 BACE1 和其他 APP 切割酶（如 γ-分泌酶）的治疗方法。BACE1 荧光共振能量转移 (FRET) 检测试剂盒为筛选潜在 BACE1 抑制剂提供了一种灵敏和高效的方法。该试剂盒使用纯化的杆状病毒表达的 BACE1 和基于“瑞典”突变体的新红色 FRET 肽底物。

BACE1 FRET 检测试剂盒具有以下特点：

•发射红光以减少化合物干扰
• 激发波长为 545 nm，读取发射波长为 585 nm
• 在溶液中执行的易于使用、快速、均匀的检测
• 适用于高通量筛选的通用规格
• 结果稳定 — 可进行长达 24 小时的测量

BACE1 FRET 检测的原理如下：用两种荧光基团（一种荧光供体（罗丹明 (Rh) 衍生物）和一种专有的淬灭受体）合成肽底物。选择这两个基团之间的距离，使得在光激发时供体 (D) 荧光能量由受体 (A) 通过量子力学现象（被称为共振能量转移）显著淬灭（图 1）。经蛋白酶切割后，荧光基团与淬灭基团分离，可恢复供体的全荧光得率。因此，弱荧光肽底物在酶促切割时变为高荧光物质；荧光增加与蛋白水解速率呈线性相关。

BACE1 酶的来源：
在重组杆状病毒感染的昆虫细胞中表达了编码人 BACE1 的第 1-460 位氨基酸的 cDNA 序列，与胞外域相对应。纯化的 BACE1 以 proBACE1 形式存在，表观分子量为 55 kDa，N 端序列为 TQHGIRLPLR。