碘化丙啶是一种常用的死细胞染色剂,其结合 DNA 时发出红色荧光。碘化丙啶也可作为多色荧光技术的复染剂。随附碘化丙啶 ReadyProbes® 试剂,我们以方便使用的滴瓶形式提供经典 DNA 染色的室温稳定溶液。每毫升只需滴注两滴,即可对细胞进行染色。
还可以:
碘化丙啶,Fluorspar 级,12.5X 浓度(13.2 µg/mL,19.7 µM),溶于水和 1% DMSO。
参见其他 Ready Probes 即用型成像试剂和附件›碘化丙啶 ReadyProbes® 试剂的特点:•即用型液体碘化丙啶配方
•无需洗涤步骤即可快速对死细胞进行染色
•便利滴瓶装即用型液体配方 — 无需稀释、称重或移液
•在室温下稳定 — 放置在工作范围内或细胞培养区域,方便取用
经典死细胞染色碘化丙啶是经典的荧光染料,广泛用于死细胞染色(图1)。可表现出足够大的斯托克斯位移,从而可以同时检测细胞核 DNA 和 FITC 或 Alexa Fluor® 488标记抗体。
方便包装碘化丙啶 ReadyProbes® 试剂采用即用型包装,可直接储存在流式细胞仪旁边或细胞培养实验室内。超便利滴瓶装液体配方(图2)能够随时随地对细胞进行染色。每 mL 只需加入两滴,即可获得较佳的明亮清晰的细胞核计数染色。
多种应用碘化丙啶不可透过膜且可从活细胞中排除。因此,其通常用于鉴定群体中的死细胞。凭借光谱特性、dsDNA 选择性以及与 DNA 结合时增强的荧光,碘化丙啶适用于在多色实验中与绿色(Alexa Fluor® 488、FITC、GFP)荧光基团配合使用。由于它对 DNA 具有较高亲和力,它还经常用于细胞计数、检测细胞凋亡以及根据 DNA 含量分选细胞。
使用建议• 在大多数情况下,2滴/1×10
6 个细胞的碘化丙啶 ReadyProbes® 试剂和15至30分钟的孵育时间将使细胞核染上明亮颜色;然而,可能需要针对一些细胞类型、条件和应用进行优化。在此种情况下,只需简单地加入更多或更少的液滴,直至获得较佳染色强度。
• 当与核酸结合时,碘化丙啶的最大荧光激发波长为 535 nm,最大发射波长为 617 nm。碘化丙啶可用氙或汞弧光灯激发,或使用 488 nm 氩离子激光来激发。通常,在流式细胞仪 FL2 通道中可以检测到碘化丙啶荧光。
•作为采用流式细胞术进行死细胞分析的首选红色细胞核染色剂,碘化丙啶 ReadyProbes® 试剂适用于与抗体应用配合使用。
参见其他 Molecular Probes® 成像工具和试剂。