pUC18 DNA

Thermo Scientific pUC18 载体是一种较小的高拷贝数大肠杆菌质粒，长度为 2686 bp。它包含与 pUC19 载体相同的多克隆位点 (MCS)，但排列方向相反。

产品优势

• 采用专有专利技术通过色谱法进行纯化
• 超螺旋形式超过 90%
• 从大肠杆菌 (dam+, dcm+) 中分离得到
• 有关 pUC18 DNA 序列、pUC19 DNA 序列、序列分析和图谱创建，请参见免费在线 REviewer 工具。

应用

• 克隆
• 插入 DNA 测序，pUC18 DNA：制备 DNA 分子量标准品

pUC18/19 质粒内容物和使用注释 - pUC18/19 质粒包含：
• 负责质粒复制的 pMB1 复制子 rep（来源 – 质粒 pBR322）。pUC 质粒的高拷贝数是由于缺少 rop 基因和 pMB1 复制子 rep 中的单点突变所致。
•bla 基因（编码 β-内酰胺酶）可对氨苄青霉素产生耐药性（来源 – 质粒 pBR322）。它与 pBR322 的不同之处在于两个点突变
• 大肠杆菌 lac 操纵子区域，包含 CAP 蛋白结合位点、启动子 P_lac、lac 抑制子结合位点和编码 β-半乳糖苷酶 N 端片段的 lacZ 基因的 5’ 末端部分（来源 – M13mp18/19）。该片段可由 IPTG 诱导合成，能够利用由宿主（突变 delta(lacZ)M15）编码的缺陷形式 β-半乳糖苷酶进行等位基因内 (α) 互补。当存在 IPTG 时，细菌合成酶的这两个片段，并在含有 X-Gal 的培养基上形成蓝色菌落。DNA 插入位于 lacZ 基因内的 MCS（lacZ 的密码子 6-7 被 MCS 取代）中可导致 β-半乳糖苷酶的 N 端片段失活并消除 α 互补。因此，携带重组质粒的细菌会产生白色菌落

图谱显示了对 pUC18 DNA 进行一次切割的酶。由 Thermo Scientific 生产的酶用橙色表示。坐标指的是每个识别序列中第一个核苷酸的位置。

图谱中显示了遗传元件的确切位置（包括终止密码子）。bla 基因核苷酸 2486-2418（互补链）编码一种信号肽。对应于 wt β-半乳糖苷酶且对于蓝白斑筛选必需的 LacZ 多肽在 nt 位置 236 处终止（互补链）。同一读取框架中的另一个 30 密码子来源于 pBR322。指示的 rep 区足以促进复制。DNA 复制在 866 (± 1) 位置启动，并按所示方向进行。携带 pMB1 和 ColE1 复制子的质粒不相容，但它们与携带 p15A 复制子的质粒（pACYC177、pACYC184）完全相容。使用氯霉素可以扩增 pMB1 衍生质粒。

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