Lipofectamine 3000 试剂

警惕:您可能正因转染效率过低而付出更多

在难以转染细胞中达到70%以上的转染效率,每次反应仅需几美分。

  • 卓越的转染效率—针对最广泛类型的难转染细胞,可将效率提升10倍
  • 作用温和,细胞毒性低—可改善细胞活力
  • 高性价比— 经济的价格,同时实现最顶级的转染结果
本页内容:

绝佳效率,高效转染多种难转染细胞 

Lipofectamine 3000试剂采用我们最先进的脂质纳米颗粒技术,实现绝佳转染性能和可重复性的结果。其可针对最广泛类型的常见及难转染细胞,实现超高转染效率(图1),同时提供更高的细胞活力。

Lipofectamine 3000试剂性能

图1.Lipofectamine 3000试剂性能优于Invitrogen Lipofectamine 2000和FuGENE HD试剂。使用上述试剂分别在96孔板内转染HEK 293、HeLa、LNCaP、HepG2和A549细胞,并在转染48小时后分析GFP表达。在所有5种细胞系内, Lipofectamine 3000试剂GFP转染效率均高于 Lipofectamine 2000和FuGENE HD试剂。


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    性质温和毒性低

    研发Lipofectamine 3000时,我们优化了转染过程的全部四个步骤,并结合了我们最先进的脂质纳米颗粒技术。绝佳的转染性能可以降低所需的试剂量,并降低所有可能对您的细胞系产生毒性的风险。

    Lipofectamine 3000 试剂方案


    图3.使用3种不同试剂以图中所示的用量在96孔板内向Hela细胞中转染绿色荧光蛋白(GFP)–表达载体。
    转染后48小时使用流式分析测定转染效率和GFP表达强度。Lipofectamine 3000试剂相比Lipofectamine 2000试剂和Lipofectamine LTX试剂获得了更高的转染效率和蛋白表达。


    助力您的癌症研究

    使用与癌症最相关的细胞系得到与您研究的问题最相关的答案。凭借更广的适用细胞类型、更高的转染效率,Lipofectamine 3000试剂让您能够灵活选择研究所用的细胞系。

    表 1.Lipofectamine 3000试剂在多种细胞系上都能获得比Lipofectamine 2000试剂更高的转染效率。

    细胞类型Lipofectamine 3000试剂转染效率Lipofectamine 3000 相较 lipofectamine 2000蛋白表达提高倍数细胞类型来源
    NIH/3T34小鼠胚胎成纤维细胞系
    4T12小鼠乳腺肿瘤细胞系
    A4312人表皮样癌细胞系
    A5493人肺癌细胞株
    ACHN2人肾癌细胞系
    bEnd.39小鼠脑内皮细胞系
    BJ3人皮肤成纤维细胞系
    BT-5494人乳腺肿瘤细胞系
    C2C123小鼠成肌细胞系
    C65大鼠神经胶质瘤细胞系
    Caco-22人结肠癌细胞系
    Caki-14人肾透明细胞癌细胞系
    CHO-K11中国仓鼠卵巢细胞系
    CHO-S1中国仓鼠卵巢细胞系
    COLO 2054人结肠癌细胞株
    COS-74猴成纤维细胞样细胞系

    转染效率(%)*<30%     30~50%    51~79%    >80%

    细胞类型Lipofectamine 3000试剂转染效率Lipofectamine 3000 相较 lipofectamine 2000蛋白表达提高倍数细胞类型来源
    DU 1452人前列腺癌细胞系
    H4603人肺癌细胞系
    H9c23大鼠心肌细胞系
    HCC19375人乳腺癌细胞系
    HCT 1161人结肠癌细胞系
    HEK-2932人胚肾细胞系
    HeLa3人宫颈癌细胞系
    Hep 3B2人肝癌细胞系
    Hepa 1-61小鼠肝癌细胞系
    Hep G29人肝癌细胞系
    Hs 578T3人乳腺癌细胞系
    HT-10801人纤维肉瘤细胞系
    HT-291人结肠癌细胞系
    Huh-74人肝癌细胞系
    Jurkat1人T淋巴细胞细胞系

    转染效率(%):<30%     30~50%    51~79%    >80%

    细胞类型来源
    Lipofectamine 3000试剂转染效率Lipofectamine 3000 相较 lipofectamine 2000蛋白表达提高倍数细胞类型来源
    K- 5621人白血病细胞系
    L68大鼠骨骼肌细胞系
    L9292小鼠纤维肉瘤细胞系
    LNCaP6人前列腺癌细胞系
    MCF 10A5人乳腺上皮细胞系
    MCF72人乳腺肿瘤细胞系
    MDA-MB-2313人乳腺癌细胞系
    MDA-MB-4531人乳腺肿瘤细胞系
    MDA-MB-4689人乳腺癌细胞系
    MDCK1犬肾细胞系
    神经-2a1小鼠神经母细胞瘤细胞系
    NCI-H232人肺腺癌细胞系
    NCI-H46017人肺癌细胞系
    P191小鼠胚胎癌细胞系
    PANC-13人上皮癌细胞系
    PC-122大鼠嗜铬细胞瘤细胞系

    转染效率(%)*<30%     30~50%    51~79%    >80%

    细胞类型来源
    Lipofectamine 3000试剂转染效率Lipofectamine 3000 相较 lipofectamine 2000蛋白表达提高倍数细胞类型来源
    RAW 264.74小鼠巨噬细胞细胞系
    RBL2大鼠嗜碱性粒细胞白血病细胞
    RD4人横纹肌肉瘤细胞系
    Saos-24人骨肉瘤细胞株
    SH-SY5Y1人神经母细胞瘤细胞系
    SK-BR-34人乳腺癌细胞系
    SK-MEL-282人黑色素瘤细胞系
    SK-N-SH6人神经母细胞瘤细胞系
    SK-OV-33人卵巢癌细胞系
    SW4802人结肠癌细胞系
    SW6205人结肠癌细胞系
    T98G4人胶质母细胞瘤细胞系
    U2OS3人骨肉瘤细胞株
    U-9372人体组织细胞性白血病细胞系
    Vero1猴肾细胞系

    转染效率(%)*<30%     30~50%    51~79%    >80%

    细胞类型Lipofectamine 3000试剂转染效率Lipofectamine 3000 相较 lipofectamine 2000蛋白表达提高倍数细胞类型来源
    NIH/3T34小鼠胚胎成纤维细胞系
    4T12小鼠乳腺肿瘤细胞系
    A4312人表皮样癌细胞系
    A5493人肺癌细胞株
    ACHN2人肾癌细胞系
    bEnd.39小鼠脑内皮细胞系
    BJ3人皮肤成纤维细胞系
    BT-5494人乳腺肿瘤细胞系
    C2C123小鼠成肌细胞系
    C65大鼠神经胶质瘤细胞系
    Caco-22人结肠癌细胞系
    Caki-14人肾透明细胞癌细胞系
    CHO-K11中国仓鼠卵巢细胞系
    CHO-S1中国仓鼠卵巢细胞系
    COLO 2054人结肠癌细胞株
    COS-74猴成纤维细胞样细胞系

    转染效率(%)*<30%     30~50%    51~79%    >80%

    细胞类型Lipofectamine 3000试剂转染效率Lipofectamine 3000 相较 lipofectamine 2000蛋白表达提高倍数细胞类型来源
    DU 1452人前列腺癌细胞系
    H4603人肺癌细胞系
    H9c23大鼠心肌细胞系
    HCC19375人乳腺癌细胞系
    HCT 1161人结肠癌细胞系
    HEK-2932人胚肾细胞系
    HeLa3人宫颈癌细胞系
    Hep 3B2人肝癌细胞系
    Hepa 1-61小鼠肝癌细胞系
    Hep G29人肝癌细胞系
    Hs 578T3人乳腺癌细胞系
    HT-10801人纤维肉瘤细胞系
    HT-291人结肠癌细胞系
    Huh-74人肝癌细胞系
    Jurkat1人T淋巴细胞细胞系

    转染效率(%):<30%     30~50%    51~79%    >80%

    细胞类型来源
    Lipofectamine 3000试剂转染效率Lipofectamine 3000 相较 lipofectamine 2000蛋白表达提高倍数细胞类型来源
    K- 5621人白血病细胞系
    L68大鼠骨骼肌细胞系
    L9292小鼠纤维肉瘤细胞系
    LNCaP6人前列腺癌细胞系
    MCF 10A5人乳腺上皮细胞系
    MCF72人乳腺肿瘤细胞系
    MDA-MB-2313人乳腺癌细胞系
    MDA-MB-4531人乳腺肿瘤细胞系
    MDA-MB-4689人乳腺癌细胞系
    MDCK1犬肾细胞系
    神经-2a1小鼠神经母细胞瘤细胞系
    NCI-H232人肺腺癌细胞系
    NCI-H46017人肺癌细胞系
    P191小鼠胚胎癌细胞系
    PANC-13人上皮癌细胞系
    PC-122大鼠嗜铬细胞瘤细胞系

    转染效率(%)*<30%     30~50%    51~79%    >80%

    细胞类型来源
    Lipofectamine 3000试剂转染效率Lipofectamine 3000 相较 lipofectamine 2000蛋白表达提高倍数细胞类型来源
    RAW 264.74小鼠巨噬细胞细胞系
    RBL2大鼠嗜碱性粒细胞白血病细胞
    RD4人横纹肌肉瘤细胞系
    Saos-24人骨肉瘤细胞株
    SH-SY5Y1人神经母细胞瘤细胞系
    SK-BR-34人乳腺癌细胞系
    SK-MEL-282人黑色素瘤细胞系
    SK-N-SH6人神经母细胞瘤细胞系
    SK-OV-33人卵巢癌细胞系
    SW4802人结肠癌细胞系
    SW6205人结肠癌细胞系
    T98G4人胶质母细胞瘤细胞系
    U2OS3人骨肉瘤细胞株
    U-9372人体组织细胞性白血病细胞系
    Vero1猴肾细胞系

    转染效率(%)*<30%     30~50%    51~79%    >80%

    Lipofectamine 3000试剂在一系列不同组织来源的癌症细胞系中比其他领先的转染试剂如Lipofectamine 2000试剂,转染效率更高。使用Lipofectamine 2000试剂时仅有25%的癌症细胞系可以被认为易于转染(转染效率>50%),而使用Lipofectamine 3000试剂时认为易于转染的细胞占60%。

    癌细胞转染效率

     


    图4.使用Lipofectamine 2000 试剂和Lipofectamine 3000试剂向17个细胞系内转染GFP表达质粒,转染在24孔板内进行,0.5 µg质粒/孔。
    48小时后分析基因表达。每个条件重复了3次,数据点表示转染效率+SD.


    制备诱导多能干细胞(iPSC)

    Lipofectamine 3000的高转染效率和Epi5™ Episomal iPSC重编程试剂盒结合可以实现高效体细胞重编程,无需电转染。

    Lipofectamine 3000的重编程效率

    图5.Lipofectamine 3000试剂盒电转染的重编程效率比较。使用Lipofectamine 3000 试剂或Neon转染系统将Epi5™载体转染进入BJ成纤维细胞以及新生儿(HDFn)和成人(HDFa)皮肤成纤维细胞并将其重编程为iPSC。采用明场显微镜和碱性磷酸酶(B) 染色法,对克隆进行(A)可视化。


    改善基因组编辑结果

    Lipofectamine 3000试剂的研发突破了细胞转染的界限并促进了新技术例如基因组编辑在生物学相关领域的应用。使用这一新试剂,Invitrogen GeneArt TALsCRISPR 在HepG2和U2OS细胞中对基因组AAVS1位点进行靶向编辑,并显示出更高的转染效率、平均荧光强度和基因组剪切效率。这些转染技术上的进步简化了令人头疼的下游工作流程,使得对干细胞的操作更为简单,并提高了转基因在细胞基因组上的位点特异性插入效率。

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    lipo-3000_figure-5

    图6.GeneArt TALsCRISPRs剪切效率。TALs 和 CRISPRs 靶向 (A) U2OS 和(B) HepG2 细胞系内的AAVS1 位点。采用Invitrogen GeneArt 基因组剪切检测试剂盒分析剪切效果。

    lipo-3000_figure-6

    图7.CRISPR载体的转染效率和蛋白表达。含有报告基因开放阅读框(OFP)的载体被Lipofectamine 2000或Lipofectamine 3000 试剂转染进 (A) U2OS 和 (B) HepG2细胞系。柱状图显示报告基因表达,图片显示相应的细胞内OFP荧光蛋白的表达。


    转染干细胞

    转染干细胞

    图8.转染干细胞。使用Lipofectamine 3000试剂转染 (A) H9 ESCs 或(B) iPSCs。使用荧光显微镜观察细胞并通过流式细胞仪检测转染效率。

    叶子图标 Sustainable packaging

    包装必须保护内部产品——但这并不意味着必须牺牲可持续性。Lipofectamine产品在常温下运输,每年将24,000立方英尺的膨胀聚苯乙烯(EPS)冷却箱从垃圾填埋场中回收。我们通过减少80吨的碳足迹(CO2当量)来降低包装和运输这些产品的环境影响。

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