Search Thermo Fisher Scientific
确保 mRNA 纯度对于确定其在翻译过程中的稳定性和蛋白产量至关重要。通过纯化可以去除过量的组分 (短链或双链 RNA ， DNA) ，以提高翻译效率。
mRNA 纯化
使用离子交换柱可最有效地纯化 mRNA ，以确保更高得率。Thermo Scientific DNASwift SAX-1 色谱柱包含高表面积的单片固定相，具有高载量，可在分析规模纯化时提供高得率，如DNASwift 整体柱适用于 DNA 和 RNA 寡核苷酸纯化的手册中所示。当纯化优先于分离度时，推荐使用 DNASwift 品牌色谱柱进行毫克级的粗混合物分离。
在 mRNA 疗法的酶促生产过程中，将不完全 mRNA 产物与双链 (ds) RNA 等其他潜在杂质结合在一起。此外，在整个生产和储存过程中， RNA 和 RNA 治疗可以通过暴露于热，水解，氧化，光和核糖核酸酶来降解。在 mRNA 治疗生产过程中，评估批次间一致性，工艺重复性和由此产生的 mRNA 质量非常重要。
RNase 映射方法可用于 RNA 序列图谱分析，以快速鉴定，表征和对具有高序列覆盖率的 mRNA 治疗药物进行测序，为身份验证，序列验证和杂质分析提供重要信息。
可使用 Thermo Scientific SMART Digest RNase 试剂盒进行 RNase 酶切，其设计用于诱导缺失的切割，以创建可与原始 RNA 序列独特匹配的更长的片段。我们的 SMART Digest RNase 试剂盒通过提供与自动化兼容的形式的快速，简单的 mRNA 酶切方法，提供高重现性，高灵敏度和高质量数据，在寡核苷酸映射的样品制备方面取得了重大进步。
对部分 RNase 酶切有益，因为完全酶切会产生过多的小寡核苷酸。部分酶切可能具有挑战性，但使用 专门开发的固定在磁粒子上的特异性开发的 Thermo Scientific SMART Digest RNase T1 酶，可以通过在短时间内去除磁粒子来控制酶反应。然后在长的 Thermo Scientific DNAPac RP 色谱柱上进行分离 ，以确保此类映射序列的必要峰容量。这种映射序列的完整设置在 使用质谱分析的 RNA 和 mRNA 治疗药物的表征和序列图分析中有详细说明。
将 mRNA 引入细胞质中
无论其治疗作用机制如何，一些治疗性 RNA 分子如 mRNA ，其阴离子电荷以及其对血流和组织中存在的 RNase 的敏感性，都使治疗性 RNA 很难有效地进入细胞并自行发挥作用。
脂质纳米微粒 (LNP) 是用于 核酸和疫苗的体内递送的有效非病毒运载工具。LNP 已越来越多地应用于基因治疗，蛋白替代治疗和基于 mRNA 的疫苗开发领域，用于治疗癌症和传染病。mRNA 分子的递送需要 LNP 递送系统的细胞摄取，随后是 mRNA 进入靶细胞的细胞溶质中，开始翻译过程。利比里亚国家警察的组成是职能的一个重要方面，因此必须在拟订过程中加以说明。因此，配方中脂质的鉴定，比值和纯度被认为是安全和疗效的关键质量属性。
Thermo Scientific Accucore C30 色谱柱 是疏水，长链化合物快速，高分离度分离的理想选择。使用 Accucore C30 色谱柱分析 LNP 的适当方法见应用说明， 使用 UHPLC-CAD 分析脂质纳米颗粒 (LNP) 成分。
For Research Use Only. Not for use in diagnostic procedures.