液相色谱分析人员目前面临的最大挑战之一是分析物检测法没有单一方法可以可靠地测量所有化合物。

通常,分析物对一种检测形式的响应比另一种检测更强烈,或者根本不响应。最需要的是能够检测一系列分析物—从小分子到抗体,并提供准确定量分析的响应。

适用于样品中多种分析物与 UV 检测器和质谱仪 (MS) 不兼容的复杂分离,例如缺乏发色团或无法进行离子化的化合物时,您可以采用一种称为电雾式检测的通用检测方法。

凭借应用多功能性,电雾式检测器 (CAD) 现在已是用于常规和复杂分离的首选通用检测器,其驱动因素是对灵敏,近通用的分析物响应和无标准品定量的需求。

Charged analyte detection
CAD 可测量上述两个样品中的所有分析物。其他探测器的范围更有限。例如,质谱法(MS)要求分析物形成气相离子(A),而UV检测器的响应取决于发色团的性质(A和B)。

CAD 可检测所有非挥发性和许多半挥发性化合物,但响应不同:

  • 非挥发性组分无论允许标准相对定量的化学结构如何,都能提供均一的分析物响应
  • 半挥发性物质因信号降低而表现出不均匀的响应,这取决于挥发性和 LC 方法条件,并且这种效应变得更加突出,尤其是在较低浓度下

近似通用检测器的最理想功能是,在无法进行单次校准定量时,可实现像 CAD 一样均一的分析物响应,使得能够定量测量不兼容紫外可见光和 MS 检测的化合物以及相对含量的化合物。

通过满足分析型&研发研究的灵活性和性能需求,以及 QA/QC 研究中生产质量控制的简单性和可重现性需求, CAD 使每一个 LC 分析都更加可靠。

CAD还可以提高您的分析操作的效率,并可能通过发现其他检测方法未发现的一系列分析物来开辟全新的可能性。

使用 CAD 的主要优点包括:

  • 对所有不受分析物结构影响的非挥发性化合物均具有精确的相对响应
  • 出色的亚纳克灵敏度,加上宽动态范围,可实现无与伦比的性能
  • 未提供单一校准物,可用于定量多种分析物

CAD和蒸发光散射检测器(ELSD)都是蒸发气溶胶检测器,能够检测非挥发性和许多半挥发性化合物。但是,检测微粒的不同之处在于两种技术之间,这一差异会显著影响检测器性能。

CAD 响应取决于颗粒电荷,检测器可以测量更小的电荷颗粒并检测更少的分析物,且检测更好的灵敏度。

相比之下, ELSD 响应取决于粒径,并且随着颗粒大小和分析物量的减少,光散射效率会大大降低。

对于 ELSD ,您需要更大的颗粒和比 CAD 存在更多分析物。

   与 ELSD 相比, CAD 具有其他许多优点,如

  • CAD 响应不受诸如折射率之类分析物的光学特性影响
  • 接近均匀的分析物响应和   标准品游离定量
  • 单个雾化器适用于所有流速范围
  • 更高的灵敏度和更宽的动态范围
  • 响应曲线较不复杂

紫外可见检测器 (UVD) 需要分析物有发色团进行检测,但问题并非所有化合物都有足够强的发色团。对于这些化合物,您可以使用低波长紫外检测,但在区分目标峰与未知峰时可能会出现选择性问题。 

这种方法也缺乏灵敏度,并且仅与某些溶剂兼容。例如,当化合物吸收低于洗脱液的截止波长 (如乙腈,波长为 190 nm) 时,您无法轻松检测到未知峰。

通过 CAD ,您可以轻松检测目标化合物和杂质,无论溶剂吸光度特性如何,从而获得更高的检测灵敏度以及更好的基线。

折射率检测 (RID) 具有通用缺陷,例如梯度洗脱不兼容性和可轻易上手数小时的广泛启动时间。

另一方面, CAD 可用于等度和梯度分离,灵敏度更高,并且需要的平衡时间更短。

虽然质谱 (MS) 检测强大,但该技术仅在化合物形成气相离子时才适用。该响应可能受离子抑制影响,如果没有同位素标准品,则难以定量。

与 MS 不同, CAD 响应独立于离子形成,因此您   可以自由地使用替代标准品对分析物进行定量分析

此出版物集合是演示电雾式检测器分析能力的资源,其广泛范围和范围涵盖了文献中的不同分析应用。

电雾式检测具有多功能性,并可使色谱工作人员使用传统的 HPLC , UHPLC 和纳米流分离。在许多情况下, CAD 无需衍生化或样品预处理,可实现稀释一键式操作。

生物 / 制药,食品和饮料,天然产品,基础研究以及工业和环境检测等多种领域的科学家均依赖于这种检测方法进行完整分析。

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常见问题解答

CAD和ELSD都是蒸发气溶胶检测器,能够检测非挥发性和许多半挥发性化合物。但是,这两种技术的颗粒检测方式有所不同。CAD 测量颗粒电荷,而 ELSD 测量颗粒散射光的能力。

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