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抗兔二抗是亲和纯化的多克隆抗体或单克隆抗体,对兔免疫球蛋白类别和片段具有良好的特异性。可用于多种宿主物种,包括山羊、驴、小鼠、鸡和绵羊。抗兔二抗也有多种偶联物:
用来自靶标物种的免疫球蛋白(Ig)的混合群体免疫宿主动物来产生抗兔二抗。在此情况下,免疫球蛋白来自兔,并被引入可用宿主物种之一:山羊、驴、小鼠、鸡或绵羊。在宿主动物免疫系统对兔免疫球蛋白产生应答后,收集并纯化由此产生的抗体。
抗兔二抗提供全 IgG 或 F(ab')2 片段。使用与琼脂糖支持物偶联的靶抗原(一抗和片段)对这些抗体的每一种进行亲和纯化。此种亲和纯化技术有助于消除非特异性蛋白的交叉反应性,从而产生高特异性和低背景信号。偶联抗体在标记前经过亲和纯化。
将抗原纯化的抗体吸附到含有所选物种的固定血清蛋白或 IgG 的亲和柱上,进一步纯化所选的二抗。此种额外处理可最大程度地降低抗体与所选物种血清蛋白的交叉反应性。根据处理量,这些抗体被指定为交叉吸附或高度交叉吸附。
用60 µM 氯喹处理 HeLa 细胞过夜。次日,将细胞固定并透化,随后用1 µg/mL 抗 LC3B 和 Invitrogen 山羊抗兔二抗-Alexa Fluor 488 绿色(货号 A-11034)进行标记。用 Invitrogen HCS Cellmask 深红色染料(紫色)和1 μg/mL Hoechst 33342(蓝色)染料对细胞进行复染。在 Nikon D200 广视野显微镜上对细胞进行成像。
使用 Invitrogen 抗 β III 微管蛋白抗体(货号480011)对神经元进行免疫荧光分析。将来源于 H9 胚胎干细胞的 GABA 能前体细胞分化 7 天,用 GABA 抗体(货号 PA5-32241,1:5,000)进行染色,随后用 Invitrogen 驴抗兔 IgG (H+L) 二抗-Alexa Fluor 488 偶联物(货号 A21206,绿色)和神经元标记物 β III 微管蛋白(货号 480011,1:1,000)进行染色,然后用 Invitrogen 山羊抗小鼠 IgG 二抗-Alexa Fluor 594 偶联物(货号 A11005,红色)进行染色。核 DNA 用 DAPI(蓝色)染色。
免疫细胞化学中使用山羊抗兔 IgG(H+L)多克隆二抗(A-11034),讨论使用微管相关蛋白 1 轻链 3(LC3)和 p62 评估自噬的局限性。Gómez-Sánchez R, Pizarro-Estrella E, Yakhine-Diop SM et al.(2015) Routine western blot to check autophagic flux: cautions and recommendations.Analytical Biochemistry 477: 13-20.
免疫组织化学冷冻切片中使用山羊抗兔 IgG(H+L)多克隆二抗(A-11008),使用小发夹 RNA 特异性敲低成年小鼠大脑不同区域的含 α3 的钠泵。Fremont R, Tewari A, Khodakhah K. (2015) Aberrant Purkinje cell activity is the cause of dystonia in a shRNA-based mouse model of rapid onset dystonia-parkinsonism.Neurobiology of Disease 82: 200-212.
免疫细胞化学中使用驴抗兔 IgG(H+L)多克隆二抗(A-21206),显示 Basonuclin-1 调节 TGF-β 诱导的乳腺上皮细胞的上皮去分化。Feuerborn A, Mathow D, Srivastava PK et al.Basonuclin-1 modulates epithelial plasticity and TGF-β1-induced loss of epithelial cell integrity.Oncogene 34(9): 1185-1195.
Thermo Scientific Superclonal 二抗代表了重组抗体技术的突破,可在多种应用中精确且准确地检测小鼠、兔和山羊一抗。每种 Superclonal 二抗均经过专门配制和优化,可助您实现出色的 ELISA、免疫印迹和细胞成像结果。