使用M-CSF体外刺激单核细胞诱导巨噬细胞

组织巨噬细胞源自于单核细胞。从血液中分离细胞并在含血清的培养基中培养，贴壁的单核细胞就会分化为巨噬细胞。在巨噬细胞培养中，我们建议您加入 M-CSF 。加入 IL-4、IL-10 或 TGF-β 等其他细胞因子有助于提高细胞存活。以下方案适用于 T25 或 T75 烧瓶，但可等比例缩小到 100 mm 培养皿或培养板。

巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)，也称为CSF-1，是一种四-α-螺旋束细胞因子，是巨噬细胞存活、增殖和分化的主要调节因子。M-CSF是单通膜蛋白，通过二硫键连接的同型二聚体或异二聚体。M-CSF对破骨细胞祖细胞的存活和增殖也是必需的。M-CSF还可以促进和增强巨噬细胞对肿瘤细胞和微生物的杀伤，诱导巨噬细胞释放细胞因子和其他炎症调节因子，并刺激细胞吞噬作用。

• 带透气盖的 T25 或 T75 无菌烧瓶（例如 Nunc EasYFlask 细胞培养瓶，T25，过滤盖，货号：156367）
• RPMI 1640 培养基（例如 BenchStable RPMI 1640 培养基，货号：A4192301）
• 胎牛血清（例如 Gibco 胎牛血清，货号：26140087，或 小包装胎牛血清，货号：A3160401）
• 左旋谷氨酰胺（例如 200 mM 左旋谷氨酰胺，货号：25030149）
• 可选：青霉素-链霉素（例如 Gibco 青霉素-链霉素，货号：15140148）
• M-CSF 纯化蛋白（例如 Gibco M-CSF 重组人蛋白，货号：PHC9504）
• 可选：IL-4 纯化蛋白（例如 IL-4 重组人蛋白，货号：A42602）
• 磷酸盐缓冲液（例如 Gibco PBS (10X)，pH 7.4，货号：70011044）
• EDTA（例如 UltraPure 0.5M EDTA，pH 8.0，货号：15575020）
• 50 mL 锥形管（例如 Nunc 50 mL 无菌聚丙烯锥形离心管，货号：339652）
• 流式染色缓冲液（例如 eBioscience 流式染色缓冲液，货号：00-4222-26）

• 磷酸盐缓冲液（例如 Gibco PBS (10X)，pH 7.4，货号：70011044）
• 15 mL 或 50 mL 锥形管（例如 Nunc 15 mL 无菌聚丙烯锥形离心管，货号：339650）
• Ficoll-Paque^® 密度分离培养基
• 流式染色缓冲液（例如 eBioscience 流式染色缓冲液，货号：00-4222-26）