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外泌体检测和研究
外泌体是包含了复杂RNA和蛋白质的小膜泡 (30–150nm)，由所有体外和体内细胞持续分泌。由于人体内复杂的功能，包括细胞间通讯和信号转导，外泌体正在改变研究。这些细胞外囊泡正在生长，这既是为了了解其生物学功能，也是为了将其用于实际应用，如无创诊断和高级治疗开发。
Dynabeads提供一系列外泌体提取分离的产品和工具，包括外泌体提取试剂盒、Gibco无外泌体胎牛血清 (FBS)、KingFisher Flex自动化核酸纯化系统等，可用于表征和分析其RNA和蛋白质含量，以及体外和体内追踪，以帮助您进一步了解这些迷人的外泌体。
外泌体提取检测和研究产品
使用Dynabeads进行外泌体提取分离
超速离心方案可能冗长乏味且耗时的。您可使用灵活且可扩展的总外泌体分离试剂从细胞培养基或任何体液中即刻分离完整的外泌体。这些试剂及其随附的方案是多种试验的理想选择，包括处理少量样本和处理多个样本。
- 开始采样
- 试剂孵育和低速离心
- 分子分析、生物分析和完整的外泌体检测分析
完整外泌体检测分析
由于其30-150nm的小尺寸，外泌体检测分析非常具有挑战性。不过，仍有几种方法可用于完整的外泌体分析。
- 流式细胞分析——使用配备OD2-488/10滤光片（货号100022768）的Attune NxT流式细胞仪可降低背景噪声，并能够分辨出100 nm以下的EV进行单颗粒大小分析。再结合流式抗体CD9、CD63、CD81（外泌体表面标记物）或是细胞染料标记进一步分析外泌体。流式细胞术外泌体检测方案。Dynabeads 表面可以实现对外泌体的免疫磁珠捕获，通常可以在一小时内完成清晰而明确的FFC/SSC检测。您可以对从细胞培养物中富集的总外泌体的亚群进行分析，使用CD63特异性试剂或者将链霉亲和素试剂与您选择的生物素化抗体配合使用。
- 光学显微镜——可以对外泌体RNA或膜组分进行标记，使外泌体在显微镜下可见。Invitrogen 专用吸附柱可用于去除未结合的染料。这些吸附柱还允许快速更换缓冲液、脱盐或去除低分子量（<MW 3000）污染物。
- 电子显微镜 (EM) —使用 Invitrogen Dynabeads 磁分离技术的优势之一在于可以获得纯净的外泌体亚群，从而使您可以直接进行电镜分析。您可以使用Invitrogen CD9、CD63、CD81或EpCam特异性试剂来分析从细胞培养物中富集的总外泌体中的亚群，或者使用Invitrogen链霉亲和素试剂结合您选择的生物素化抗体。
外泌体载体分离和分析
外泌体已经过证明可在不同细胞类型之间运输一系列分子。其载体包括各种蛋白质、mRNA（片段和全长）、rRNA、tRNA、miRNA和ncRNA。
- RNA&蛋白质分离—可以使用Invitrogen 总外泌体RNA和蛋白质分离试剂盒来纯化总RNA或从预先富集的外泌体的相同样本中回收蛋白质和RNA。该试剂盒兼容所有外泌体分离方案。
- 蛋白质分析——特定单克隆抗体（CD9、CD63和CD81）能够通过蛋白质印迹分析对细胞和外泌体抗原进行检测。如果您正在寻找能够在同一块凝胶上比较多种蛋白质样品的方法，且希望能够保持外泌体蛋白复合物的完整性，您应当查看快速而温和的基于Dynabeads的免疫沉淀方法，将 Invitrogen A蛋白或G蛋白与您选择的一抗配合使用。
- 外泌体蛋白的表达丰度相对于常规细胞样品较低，对于这种样品珍贵的低丰度蛋白检测，全系列iWestern方案，Invitrogen 通用抗体及Alexa Fluor Plus荧光二抗，低至阿克（10-18g）级别的蛋白也能轻松捕获。
- RNA分析——外泌体RNA与细胞膜成分可采用荧光染料进行标记，而未结合的染料可通过Invitrogen核酸纯化柱轻松去除。使用 总外泌体RNA和蛋白质分离试剂盒 回收的外泌体RNA可以通过下列方法进行分析，如qRT-PCR（使用Applied Biosystems TaqMan 测定、 RNA测序或二代测序工具。可以采用荧光染料标记外泌体RNA和膜组分，未结合的染料可以通过使用Invitrogen 离心柱去除。
无外泌体胎牛血清 (FBS)
与自制材料和竞争对手的胎牛血清 (FBS) 相比，Gibco无外泌体胎牛血清 (FBS) 具有最高的外泌体去除水平，同时保留了细胞培养所需的重要营养。Gibco™无外泌体胎牛血清 (FBS) 的工作降低了超速离心法带来的低效率影响。产品的亮点包括：
- ≥90%的外泌体去除
- 每批次均经过细胞培养检测
- 专为外泌体研究开发
细胞外囊泡分离和表征的标准化是国际细胞外囊泡学会 (ISEV) 多年以来的迫切需求。使用KingFisher Flex自动化核酸纯化系统结合Dynabeads磁珠，开发出一种高重复性的pull-down 和分析方法。
使用Dynabeads进行外泌体提取分离
超速离心方案可能冗长乏味且耗时的。您可使用灵活且可扩展的总外泌体分离试剂从细胞培养基或任何体液中即刻分离完整的外泌体。这些试剂及其随附的方案是多种试验的理想选择，包括处理少量样本和处理多个样本。
- 开始采样
- 试剂孵育和低速离心
- 分子分析、生物分析和完整的外泌体检测分析
完整外泌体检测分析
由于其30-150nm的小尺寸，外泌体检测分析非常具有挑战性。不过，仍有几种方法可用于完整的外泌体分析。
- 流式细胞分析——使用配备OD2-488/10滤光片（货号100022768）的Attune NxT流式细胞仪可降低背景噪声，并能够分辨出100 nm以下的EV进行单颗粒大小分析。再结合流式抗体CD9、CD63、CD81（外泌体表面标记物）或是细胞染料标记进一步分析外泌体。流式细胞术外泌体检测方案。Dynabeads 表面可以实现对外泌体的免疫磁珠捕获，通常可以在一小时内完成清晰而明确的FFC/SSC检测。您可以对从细胞培养物中富集的总外泌体的亚群进行分析，使用CD63特异性试剂或者将链霉亲和素试剂与您选择的生物素化抗体配合使用。
- 光学显微镜——可以对外泌体RNA或膜组分进行标记，使外泌体在显微镜下可见。Invitrogen 专用吸附柱可用于去除未结合的染料。这些吸附柱还允许快速更换缓冲液、脱盐或去除低分子量（<MW 3000）污染物。
- 电子显微镜 (EM) —使用 Invitrogen Dynabeads 磁分离技术的优势之一在于可以获得纯净的外泌体亚群，从而使您可以直接进行电镜分析。您可以使用Invitrogen CD9、CD63、CD81或EpCam特异性试剂来分析从细胞培养物中富集的总外泌体中的亚群，或者使用Invitrogen链霉亲和素试剂结合您选择的生物素化抗体。
外泌体载体分离和分析
外泌体已经过证明可在不同细胞类型之间运输一系列分子。其载体包括各种蛋白质、mRNA（片段和全长）、rRNA、tRNA、miRNA和ncRNA。
- RNA&蛋白质分离—可以使用Invitrogen 总外泌体RNA和蛋白质分离试剂盒来纯化总RNA或从预先富集的外泌体的相同样本中回收蛋白质和RNA。该试剂盒兼容所有外泌体分离方案。
- 蛋白质分析——特定单克隆抗体（CD9、CD63和CD81）能够通过蛋白质印迹分析对细胞和外泌体抗原进行检测。如果您正在寻找能够在同一块凝胶上比较多种蛋白质样品的方法，且希望能够保持外泌体蛋白复合物的完整性，您应当查看快速而温和的基于Dynabeads的免疫沉淀方法，将 Invitrogen A蛋白或G蛋白与您选择的一抗配合使用。
- 外泌体蛋白的表达丰度相对于常规细胞样品较低，对于这种样品珍贵的低丰度蛋白检测，全系列iWestern方案，Invitrogen 通用抗体及Alexa Fluor Plus荧光二抗，低至阿克（10-18g）级别的蛋白也能轻松捕获。
- RNA分析——外泌体RNA与细胞膜成分可采用荧光染料进行标记，而未结合的染料可通过Invitrogen核酸纯化柱轻松去除。使用 总外泌体RNA和蛋白质分离试剂盒 回收的外泌体RNA可以通过下列方法进行分析，如qRT-PCR（使用Applied Biosystems TaqMan 测定、 RNA测序或二代测序工具。可以采用荧光染料标记外泌体RNA和膜组分，未结合的染料可以通过使用Invitrogen 离心柱去除。
无外泌体胎牛血清 (FBS)
与自制材料和竞争对手的胎牛血清 (FBS) 相比，Gibco无外泌体胎牛血清 (FBS) 具有最高的外泌体去除水平，同时保留了细胞培养所需的重要营养。Gibco™无外泌体胎牛血清 (FBS) 的工作降低了超速离心法带来的低效率影响。产品的亮点包括：
- ≥90%的外泌体去除
- 每批次均经过细胞培养检测
- 专为外泌体研究开发
细胞外囊泡分离和表征的标准化是国际细胞外囊泡学会 (ISEV) 多年以来的迫切需求。使用KingFisher Flex自动化核酸纯化系统结合Dynabeads磁珠，开发出一种高重复性的pull-down 和分析方法。
订购信息
我们请10位杰出的科学家来分享他们有关外泌体研究的想法。
视频演示：外泌体的RNA图谱
由Thermo Fisher Scientific的科学家Sasha Vlassov进行演示。包括演示后的答疑环节。
仅供科研使用，不可用于诊断目的。