使用 Gibco 培养基,改善无血清杂交瘤培养
  • 从化学成分明确、无蛋白质和无血清配方中选择
  • 使用化学成分明确、无蛋白质补充剂,极大限度地提高性能
  • 非动物源性产品可极大限度地降低风险
  • 提供定制的产品和包装
  • 易于扩大至大规模培养
产品CD 杂交瘤培养基CD 杂交瘤 AGT™✝✝杂交瘤-SFMPFHM-II
培养基类型化学成分明确的培养基化学成分明确的培养基无血清培养基
低蛋白 20 μg/ml
无蛋白质培养基
非动物源性
优化用于人、小鼠、大鼠杂交瘤、骨髓瘤。与 250X 胆固醇脂质浓缩液配合使用时,适合 NS0、NS-1 和其他类固醇依赖型细胞人、小鼠、大鼠杂交瘤、骨髓瘤
应用生长和 MAb 生产。可用于在工程化骨髓瘤细胞系中表达其他蛋白质。


✝提供药物主文件
✝✝干粉形式的 CD 杂交瘤培养基

注:
不同来源的细胞系和相同细胞系的不同克隆可能具有高度特异的营养要求,因此可能更偏好一种培养基。应评估多种培养基配方(如果有),以确定理想选择。

CD 杂交瘤培养基

化学成分明确、无蛋白质配方

Gibco CD 杂交瘤培养基是一种化学成分明确的无蛋白质培养基,经过优化,适用于在人、小鼠和大鼠杂交瘤和骨髓瘤中生产单克隆抗体和重组蛋白。因 CD 杂交瘤培养基使用非动物源性材料制成,所以相比成分不太明确的培养基,在本产品中生长的培养物的蛋白纯化和下游处理更简单。其也不太可能含有能影响您培养物的外源性因子。CD 杂交瘤培养基配方不含 L-谷氨酰胺,可在培养物中提供额外的稳定性。

CD 杂交瘤培养基在细胞培养密度和 IgG 生产方面优于无血清和添加血清的杂交瘤培养基,因而适用于重组骨髓瘤细胞系和传统杂交瘤的培养(图 1)。当补充 250X 胆固醇脂质浓缩液时,本培养基也非常适合脂质或胆固醇依赖性培养物,如 NS0 衍生细胞系。在传统的添加血清培养基中生长的细胞可以很容易地适应本款培养基,通常只需 3 代。无论您是在固定摇瓶、摇动悬浮培养系统或是生物反应器规模的培养系统中进行培育,CD 杂交瘤培养基都能支持极大的细胞密度和较高的蛋白产量。

CD 杂交瘤培养基提供即用型 (1X) 液体形式和易于使用的 Advanced Granulation Technology™ (AGT™) 形式。AGT™ 培养基较为全面且 pH 可调整;L-谷氨酰胺依赖型系统仅需标准添加 L-谷氨酰胺(或 GlutaMAX™-I 添加剂)。与传统粉末培养基相比,颗粒即时溶解,可更快地制备培养基。AGT™ 培养基有助于降低总周期成本,减少原材料规划、采购和测试以及培养基制备所需的时间。

杂交瘤 TP4 - 3.1 的生长

杂交瘤 TP4 - 3.1 的 InG 生产

图 1.Gibco CD 杂交瘤培养基比其他培养基获得更高的活细胞密度且能在 Hybridoma TP4-3.1 细胞中产生更多抗体。

在比较细胞生长研究中,评估分批培养物的生长和单克隆抗体生产之前,在 IMDM + 10% FBS 中生长的杂交瘤 Tp4-3.1(专有)细胞通过少至 3 次传代即可适应在其他培养基中生长。

CD 杂交瘤培养基在使用前添加了 8 mM L-谷氨酰胺。其他培养基也按照制造商的说明添加了必要的成分。在轨道摇床平台上以 125–135 rpm 的速度,摇动在 125 mL 一次性塑料摇瓶(35 mL 培养体积)中生长的小规模 TP4-3.1 悬浮培养物。细胞接种密度为 105 个活细胞/mL。所有培养物均在密度 8% CO2/空气的潮湿环境中培养。使用电子粒子计数器确定总细胞数;通过台盼蓝染料排除来评估细胞活力。通过 ELISA 测量 IgG。

注释:
A
–Gibco CD 杂交瘤培养基
B– Gibco IMDM+10%FBS
C– Gibco 杂交瘤-SFM 
DEF 是其他制造商生产的培养基。

PFHM-II 无蛋白质杂交瘤培养基

无蛋白质配方

PFHM-II 是一种无蛋白质培养基,经过优化,适用于人、小鼠和大鼠杂交瘤和骨髓瘤的生长,以及单克隆抗体的生产。它不含可能干扰下游蛋白质纯化的任何多肽,如生长或附着因子。针对单克隆抗体生产,PFHM-II 与添加血清的培养基表现一样优异。

杂交瘤-SFM

无血清配方

杂交瘤-SFM 是一种极低蛋白的培养基 (20 μg/mL),经过优化,适用于人、小鼠和大鼠杂交瘤和骨髓瘤的生长,以及单克隆抗体 (mAb) 的生产。相比添加血清的培养基,它为杂交瘤细胞提供了良好的生长和维护条件,可获得更高的 mAb 产量并实现更简单的下游处理(图 2)。全面的的即用型培养基补充了痕量元素、矿物和微量 (20 μg/mL) 的明确蛋白质(胰岛素和转铁蛋白)。

与添加血清的培养基不同,杂交瘤-SFM 不含 BSA、类固醇和内源性牛免疫球蛋白,有助于特异性 mAb 的纯化。本产品使用方便,支持在多种培养系统中培育各种杂交瘤细胞系。大多数杂交瘤只需要极少的连续适应代数,或不需要针对本培养基的适应期。


MAb 生产和细胞数累计


图 2.相比 D-MEM,Gibco 杂交瘤-SFM 可从类似细胞量中获得更高的单克隆抗体产量。

细胞在杂交瘤-SFM 或含 FBS 的 D-MEM 中培养(10% 至第 10 天,7.5% 至第 13 天,以及 5% 自第 13 天)。监测细胞数量和 mAb 生产。与添加血清的培养基相比,杂交瘤-SFM 中生长的培养物的细胞数量相似,但是生产的 mAb 显著增加。


仅供研究使用。 不得用于任何动物或人类的治疗或诊断。