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骨骼肌中在保持人体生理和代谢健康方面起到重要作用。GIBCO 人骨骼肌成肌细胞 (HSkM) 提供一个易于使用且高性价比细胞系统,以研究与肌肉质量损失和葡萄糖吸收相关的条件。细胞后接种到添加了 2% 马血清的 DMEM中 ,通常在48小时内即可使用(图1)。这些原代细胞已被证明可以响应生理浓度的 TGF-β1 和肌肉生长抑制素等配体,因而,比常用啮齿类动物模型更具相关性(图2)。
解冻细胞,在添加了 2% 马血清的 DMEM 中铺板培养。细胞通常在48小时内分化并形成可用于各种应用的肌管。系统兼容于6至384孔的多孔规格。右上图显示使用抗小鼠 Alexa Fluor 546 二抗(货号 A11030)和 Hoechst 33342 核复染(货号 H3570)染色检测的含结合抗肌钙蛋白 mAb(克隆 CT3)的分化细胞。 |
图2.生理相关的细胞模型。 GIBCO 人骨骼肌成肌细胞响应生理水平的 TGF-β1 和 IGF-1。添加 TGF-β1 会抑制分化,而添加 IGF-1(货号 PHG0075)会减弱这种效果。抗肌钙蛋白染色法如图1所述。 |
在上面的例子中,在使用 BacMam 编码的 LanthaScreen Smad3-GFP 转导肌管后,通过TR-FRET 测定响应 TGF-β1 或肌肉生长抑制素Smad3 磷酸化。 |
图3.利用 BacMam 递送系统,可使用 LanthaScreen 通路传感器转导分化的 HSkM 细胞,从而实现针对特异信号通路的化合物筛选。
仅供科研使用,不可用于诊断目的。