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选择性抗生素
Gibco高质量的选择剂为您的研究需求提供独特的解决方案，例如双重选择和快速建立稳定细胞系。
查看我们的 抗生素种类以及抗真菌剂的完整列表。此外，还探索 在细胞培养中使用抗生素的问题。
本页内容：
真核选择性抗生素
| 选择性抗生素 | 最常见的选择性使用方式 | 常用工作浓度 | 可用粉末规格尺寸 | 可用液体规格尺寸 |
|---|---|---|---|---|
| 杀稻瘟菌素 | 真核生物和细菌 | 1-20 µg/mL | 50 mg | 10 x 1 mL, 20 mL |
| 庆大霉素(G-418) | 真核生物 | 100–200 µg/mL 细菌 200-500 μ µg 个哺乳动物细胞 | 1 g, 5 g, 10 g, 25 g | 20 mL, 100 mL |
| 潮霉素 B | 双选择实验和真核细胞 | 200-500 µg/mL | — | 20 mL |
| 麦酚酸 | 哺乳动物和细菌 | 25 µg/mL | 500 mg | — |
| 嘌呤霉素 | 真核生物和细菌 | 0.2-5 µg/mL | — | 10 x 1 mL, 20 mL |
| 博莱霉素 | 哺乳动物，昆虫，酵母，细菌和植物 | 50-400 µg/mL | — | 8 x 1.25 mL, 50 mL |
细菌选择性抗生素
| 选择性抗生素 | 最常见的选择使用方式 | 常见工作浓度 | 可用粉末规格尺寸 | 可用液体规格尺寸 |
|---|---|---|---|---|
| 放线菌素 D | 细菌 | 1 µg/mL | 5 mg ， 10 mg | — |
| 氨苄青霉素钠盐 | 细菌 | 10-25 µg/mL | 200 mg | — |
| 杀稻瘟菌素 | 真核生物和细菌 | 50-100 µg/mL | 50 mg | 10 x 1 mL, 20 mL |
| 卡邦西林，二钠盐 | 农杆菌和大肠杆菌 | 100-500 µg/mL | 5 g | — |
| 硫酸卡那霉素 | 细菌 | 100 µg/mL | 5 g, 25 g | 100 mL |
| 麦酚酸 | 哺乳动物和细菌 | 25 µg/mL | 500 mg | — |
| 硫酸新霉素 | 细菌 | 50 µg/mL | 100 g | — |
| 多粘菌素 B 硫酸盐 | 细菌 | 100 单位/mL | 25 MU | — |
| 嘌呤霉素 | 真核生物和细菌 | 0.2-5 µg/mL | — | 10 x 1 mL, 20 mL |
| 链霉素硫酸盐 | 细菌 | 50-100 µg/mL | — | 100 g |
| 博莱霉素 | 哺乳动物、昆虫、酵母、细菌和植物 | 75-400 µg/mL | — | 8 x 1.25 mL, 50 mL |
真核选择性抗生素
| 选择性抗生素 | 最常见的选择性使用方式 | 常用工作浓度 | 可用粉末规格尺寸 | 可用液体规格尺寸 |
|---|---|---|---|---|
| 杀稻瘟菌素 | 真核生物和细菌 | 1-20 µg/mL | 50 mg | 10 x 1 mL, 20 mL |
| 庆大霉素(G-418) | 真核生物 | 100–200 µg/mL 细菌 200-500 μ µg 个哺乳动物细胞 | 1 g, 5 g, 10 g, 25 g | 20 mL, 100 mL |
| 潮霉素 B | 双选择实验和真核细胞 | 200-500 µg/mL | — | 20 mL |
| 麦酚酸 | 哺乳动物和细菌 | 25 µg/mL | 500 mg | — |
| 嘌呤霉素 | 真核生物和细菌 | 0.2-5 µg/mL | — | 10 x 1 mL, 20 mL |
| 博莱霉素 | 哺乳动物，昆虫，酵母，细菌和植物 | 50-400 µg/mL | — | 8 x 1.25 mL, 50 mL |
细菌选择性抗生素
| 选择性抗生素 | 最常见的选择使用方式 | 常见工作浓度 | 可用粉末规格尺寸 | 可用液体规格尺寸 |
|---|---|---|---|---|
| 放线菌素 D | 细菌 | 1 µg/mL | 5 mg ， 10 mg | — |
| 氨苄青霉素钠盐 | 细菌 | 10-25 µg/mL | 200 mg | — |
| 杀稻瘟菌素 | 真核生物和细菌 | 50-100 µg/mL | 50 mg | 10 x 1 mL, 20 mL |
| 卡邦西林，二钠盐 | 农杆菌和大肠杆菌 | 100-500 µg/mL | 5 g | — |
| 硫酸卡那霉素 | 细菌 | 100 µg/mL | 5 g, 25 g | 100 mL |
| 麦酚酸 | 哺乳动物和细菌 | 25 µg/mL | 500 mg | — |
| 硫酸新霉素 | 细菌 | 50 µg/mL | 100 g | — |
| 多粘菌素 B 硫酸盐 | 细菌 | 100 单位/mL | 25 MU | — |
| 嘌呤霉素 | 真核生物和细菌 | 0.2-5 µg/mL | — | 10 x 1 mL, 20 mL |
| 链霉素硫酸盐 | 细菌 | 50-100 µg/mL | — | 100 g |
| 博莱霉素 | 哺乳动物、昆虫、酵母、细菌和植物 | 75-400 µg/mL | — | 8 x 1.25 mL, 50 mL |
G418，庆大霉素
通常被称为G418或G-418，Gibco Geneticin试剂是一种与庆大霉素相关的氨基糖苷类抗生素，通常用作真核细胞的选择性试剂。作为新霉素硫酸盐的类似物，它干扰真核细胞中80S核糖体的功能和蛋白质合成。
常见哺乳动物表达载体所用的显性抗性基因 (neor) 包含源自转座子 Tn601 (903) 或 Tn5 中的元件。在含有Geneticin筛选试剂的培养基中培养时，可在10至14天内形成表达这些抗性标记的稳定哺乳动物细胞集落。
G418 ，Geneticin 的订购信息
您的G418里有什么?
为了发挥作用，选择性试剂需要可靠、高纯度且性质一致Geneticin选择性抗生素被认为是近20年来的首选试剂，是唯一能够在哺乳动物细胞培养中提供这些特性的G-418试剂。
与其他制造商的G-418产品相比，Geneticin抗生素具有更高的纯度，因此您可以使用更少的量，并产生更大的选择压力，同时最小化来自杂质的毒性。
在评估 G-418 产品时，考虑的不仅仅是效力。还需考虑纯度和工作范围。将这三个特征综合起来，才能真正评估 G-418 的有效性。
纯度 通过HPLC测定，Geneticin选择性试剂的纯度始终保持在90%以上，远高于其他供应商。这意味着：
- 与其他G-418产品相比，可以使用15-30%更低浓度的Geneticin试剂来获得相似的选择结果。
- 当使用Geneticin而不是低纯度的G-418产品时，存活的克隆群可能会更快地形成，并且细胞看起来更健康。
效力。效力作为一个描述性术语通常与纯度同义，但质量控制数据中报告的效力与纯度无关。 效价是细菌生长抑制的衡量指标。
- 庆大霉素通常可以污染G-418 制剂，这会增加细菌检测的效力，但不会影响哺乳动物细胞筛选性。
- 低纯度G-418中的其他细菌污染物可能对哺乳动物细胞具有毒性，从而降低ED50值。
因此，比较不同供应商之间的效力值不是哺乳动物细胞筛选的相关规范。
ED50测定是在参考的NIH3T3细胞上确定的，它是真正衡量真核生物生长选择性的方法。较高的纯度通常意味着较高的ED50 值。
- 有毒杂质会降低ED50 值，这意味着抗生素选择的工作范围较窄。
- 供应商提供的一致的 ED50 值确保了在哺乳动物细胞培养应用中批次之间的性能重复性。
这意味着当购买新批次的Geneticin时，您无需重新优化理想的抗生素浓度（假设没有其他培养基的改变）。来自其他G-418供应商的不同批次显示出的 ED50 值范围很大，可能需要您针对每个批次重新优化。Geneticin 批次间一致性非常高，您不会发现批次间的选择性能有何差异。
纯度 通过HPLC测定，Geneticin选择性试剂的纯度始终保持在90%以上，远高于其他供应商。这意味着：
- 与其他G-418产品相比，可以使用15-30%更低浓度的Geneticin试剂来获得相似的选择结果。
- 当使用Geneticin而不是低纯度的G-418产品时，存活的克隆群可能会更快地形成，并且细胞看起来更健康。
效力。效力作为一个描述性术语通常与纯度同义，但质量控制数据中报告的效力与纯度无关。 效价是细菌生长抑制的衡量指标。
- 庆大霉素通常可以污染G-418 制剂，这会增加细菌检测的效力，但不会影响哺乳动物细胞筛选性。
- 低纯度G-418中的其他细菌污染物可能对哺乳动物细胞具有毒性，从而降低ED50值。
因此，比较不同供应商之间的效力值不是哺乳动物细胞筛选的相关规范。
ED50测定是在参考的NIH3T3细胞上确定的，它是真正衡量真核生物生长选择性的方法。较高的纯度通常意味着较高的ED50 值。
- 有毒杂质会降低ED50 值，这意味着抗生素选择的工作范围较窄。
- 供应商提供的一致的 ED50 值确保了在哺乳动物细胞培养应用中批次之间的性能重复性。
这意味着当购买新批次的Geneticin时，您无需重新优化理想的抗生素浓度（假设没有其他培养基的改变）。来自其他G-418供应商的不同批次显示出的 ED50 值范围很大，可能需要您针对每个批次重新优化。Geneticin 批次间一致性非常高，您不会发现批次间的选择性能有何差异。
| 规格 | Invitrogen | 供应商 A | 供应商 B | Geneticin 优势 |
|---|---|---|---|---|
纯度 (HPLC) | >90–93% | 66 – 75% | 65-82% | 纯度明显更高 |
声称的效力 (µg/mg) | 718–735 | 712-724 | 673-735 | 更严格的效力测定 |
重新测试时的效力 (µg/mg) | 718–735 | 640-659 | 621-677 | 实际效力始终较高 |
ED50 测定 (µg/ml) | 2,450–2,700 | 1,350–3,100 | 600–2,350 | 可靠的批次间筛选 |
根据 Invitrogen 的 Geneticin 原材料 QC 实验方案，分析了两个不同供应商的多个 G-418 批次。据观察，使用供应商 A 和供应商 B 的 G-418 获得的结果中所有测量参数都有很大差异，包括实际效力与所提供产品文献中报告的值不一致。重新测试的效力值与其他供应商声称的值存在差异可能是因为 G-418 参考批次和测定程序存在差异。
Geneticin 与供应商 A 和供应商 B 的选定批次 G-418 的 HPLC 数据对比。根据在Clinical Chem中发布的程序对样品进行制备和分析。(1978)，第24卷，第11号，第1940页。
博莱霉素
Gibco Zeocin 在多种生物体中都非常有效，包括哺乳动物和昆虫细胞系以及酵母、细菌和植物。作为博来霉素家族的一员，Zeocin 可通过嵌入和裂解 DNA 来导致细胞死亡。
由 Sh ble 基因产物实现对 Zeocin 的耐受性，它可结合抗生素，防止其结合 DNA。该筛选试剂对多种细胞类型有效，因此真核表达载体只需要携带一种药物筛选标记。这可以减少载体的尺寸，使亚克隆和转染更容易、更有效。
分子式：C55H83N19O21S2Cu
试剂订购信息
| 细胞类型 | 浓度(μg/mL)* | Invitrogen 携带抗性标记的载体 |
|---|---|---|
| 293 HEK | 200-400 | InsectSelect 系统、pIZ/V5-His 载体（昆虫细胞中的稳定表达） |
| CHO | ~250 | pSecTag2、pSecTag2/Hygro（分泌型哺乳动物表达） |
| COS-1 | ~400 | ZeoCassette载体（组成型 Zeocin 耐受载体） |
| HeLa | <~150 | pcDNA4 载体（组成型哺乳动物表达） |
| Jurkat T 细胞 | ~200 | pPICZ 和 pPICZ α 载体（毕赤酵母中的诱导表达） |
| NIH3T3 | ~400 | T-REx 系统、pcDNA4/TO 载体（诱导型哺乳动物表达） |
| 毕赤酵母 | ~100 | |
| S2 果蝇 | ~75 | |
| Sf9 昆虫 | ~250 | pGAPZ 和 pGAPZ α 载体（毕赤酵母中的诱导表达） |
* 应使用杀菌曲线确定用于筛选细胞系的适宜浓度。
嘌呤霉素
嘌呤霉素（Puromycin）是一种由白黑链霉菌产生的氨基苷类抗生素。其可以打乱核糖体上的肽转运，造成翻译过程中不成熟链终止，从而抑制蛋白质合成。在原核和真核细胞中，杀稻瘟菌素都是强效翻译抑制剂。链霉菌中的嘌呤霉素N-乙酰转移酶基因（pac）可使机体对嘌呤霉素耐药。
嘌呤霉素的低浓度选择
嘌呤霉素作用迅速，在低浓度下即可快速导致细胞死亡。哺乳动物贴壁细胞对浓度为 2-5 µg/mL 的嘌呤霉素敏感，而悬浮细胞对于浓度低至 0.5-2 µg/mL 的嘌呤霉素敏感。对嘌呤霉素稳定耐药的哺乳细胞可在一周内生成。
试剂订购信息
| 细胞系 | 浓度 [µg/ml] | 参比 |
|---|---|---|
| A549（肺癌） | 1.5 | Mol Cell Biol 27:324–339 (2007) |
| 1.5 | J Biol Chem 283:33394-33405 (2008) | |
| H1299（非小细胞肺癌） | 1 | Nucleic Acids Res 35:e17 (2007) |
| 1.5 | J Biol Chem 283:33394-33405 (2008) | |
| 2.5 | PNAS 105:1937-1942, 2008. | |
| HEK293（人胚胎肾脏） | 0.25 | Nucleic Acids Res36:e83 (2008) |
| 2 | Mol Cell Biol 28:4104-4115 (2008) | |
| 3 | Mol Cell Biol 27:4708–4719 (2007) | |
| 人宫颈癌细胞 | 1–2 | Genes Cells12:397–406 (2007) |
| 2 | Mol Cell Biol 28:4104-4115 (2008) | |
| 2 | PNAS 105:16490-16495, 2008. | |
| Hep G2（人肝细胞癌） | 0.3 | J Biol Chem 283:21462-21468 (2008) |
| 2 | Mol Cell Biol 28:4104-4115 (2008) | |
| 2 | J Biol Chem 283:708-715 (2008) | |
| HT1080（人 纤维肉瘤） | 0.2–0.4 | J Biol Chem 282:29314-29322 (2007) |
| 1 | J Virol 82:3320-3328 (2008) | |
| 2 | Cancer Res68: 1417–1426 (2008) | |
| 人胚胎干 (ES) 细胞 | 0.5 | Nucleic Acids Res 36:e148 (2008) |
| 1 | Stem Cells26:850–863 (2008) | |
| 5 | Stem Cells26:2245-2256 (2008) | |
MCF-7（人乳腺癌） | 0.45 | RNA 13 ： 1375-1383 (2007) |
| 1 | Cancer Res 68:1319-1328 (2008) | |
| 2 | Mol Cell Biol 28:4104-4115 (2008) | |
| MDA-MB-231（人乳腺癌） | 0.5 | Mol Cell Biol 28:997-1006 (2008) |
| 1.5 | Mol Cell Biol 27:324339 (2007) | |
| 5 | Mol Cell Biol 28:687-704 (2008) |
杀稻瘟菌素
杀稻瘟菌素是一种从灰色链霉菌中分离出的核苷类抗生素。在原核和真核细胞中，杀稻瘟菌素都是强效翻译抑制剂。杀稻瘟菌素抗性由土曲霉bsd 基因的产物决定。
低浓度杀稻瘟菌素选择
杀稻瘟菌素作用迅速，在低浓度下即可快速导致细胞死亡。大肠杆菌菌株通常对 50 μg/ml 的浓度敏感，而哺乳动物细胞对低至 2 至 10 μg/ml 的浓度已经很敏感。细胞死亡发生迅速，可在不到一周内生成具有稳定的杀稻瘟菌素抗性的哺乳动物细胞系。
试剂订购信息
| 细胞系 | 浓度 [µg/ml] | 参考文献 |
|---|---|---|
| HT1080 （人纤维肉瘤） | 1–5 10 20 | J Biol Chem 283:11556-11564 (2008) J Virol 82:7325-7335 (2008) Mol Biol Cell 19:8–16 (2008) |
| HeLa （人宫颈癌细胞） | 10 10 20 | J Gen Virol 89:2611–2621 (2008) Mol Biol Cell 19:8–16 (2008) J Immunol 181:22–26 (2008) |
| HEK293 （人胚胎肾细胞） | 5 10 | J Biol Chem 283:27534-27546 (2008) J Virol 82:1665-1678 (2008) |
| Hep G2 （人肝细胞癌） | 4 5 | J Biol Chem 283:16320-16331 (2008) Blood :113.1786–1793 (2009) |
| HT1080 （人纤维肉瘤） | 1–5 10 20 | J Biol Chem 283:11556-11564 (2008) J Virol 82:7325-7335 (2008) Mol Biol Cell 19:8–16 (2008) |
| MCF-7 （人乳腺癌） | 2 5 | Mol Cancer Res 6:555–567 (2008) Mol Endocrinol 22: 361–379 (2008) |
| A549（肺癌） | 10 | Cancer Res 68:5040–5048 (2008) |
潮霉素 B
潮霉素 B 是一种氨基糖苷类抗生素，通过干扰易位和促使80S核糖体的错译来抑制蛋白质合成。由于其作用模式不同于 Gibco Geneticin、杀稻瘟菌素 S 或 Gibco Zeocin，其非常适合与其他筛选试剂配合使用进行双筛选实验。
潮霉素选择基因和浓度
對潮霉素 B 的耐药性由大肠杆菌潮霉素抗性基因（hyg 或 hph）决定。筛选的浓度范围为 100-1000 μg/ml（通常为 200 μg/ml），应针对每个细胞系进行优化。
分子式：C20H37N3O13
FW：527.5 g/mole
试剂订购信息
| 细胞类型 | 浓度(μg/mL)* | Invitrogen 携带抗性标记的载体 |
|---|---|---|
| CHO | ~250 | pIND/Hygro 载体（Ecdyone 诱导型哺乳动物表达） |
| HeLa | ~550 | pcDNA5 载体（组成型哺乳动物表达） |
| Jurkat T细胞 | ~1,000 | pSecTag2/Hygro 载体（分泌型哺乳动物表达） |
| S2 果蝇 | 200-300 | pREP 载体（游离型哺乳动物表达） |
| pcoHygro （DES 筛选载体） |
* 应使用杀菌曲线确定用于筛选细胞系的适宜浓度。
仅供科研使用，不可用于诊断目的。
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