10 steps to improve pipetting accuracy

第 1 步

吸液之前,重复抽吸并完全排出一定量的液体至少三遍。未能预先润湿吸头会增加吸头空隙内的蒸发,可能导致移液量大大降低。预先润湿可增加吸头内的湿度,减少蒸发。

第 3 步

分液前,将吸头轻触储液瓶侧面,小心去除吸头外部液滴,确保远离吸头开口处,以免液体从吸头中流出。分液后和释放柱塞前,吸头轻触容器侧边,清除吸头中的残留液体。表面张力将有助于将残留液体排出吸头。

第 4 步

按压柱塞至第一档,将吸头浸入液体,然后释放柱塞进行吸液。使移液器离开液体,然后按压柱塞至第二档以分配全部液体。除粘性或挥发性液体外,所有其他溶液的标准(或正向)模式移液均比反向模式具有更高的准确度和精密度。反向模式通常会导致超量。因此,建议评估实验中可能出现的超量移液的影响并根据需要进行调整。

在该实验中,使用正向和反向移液技术将 200 μL 粘性液体(甘油)移液 10 次。使用正向移液技术,调整所使用的移液器以适用于移取甘油。该图描述了这两种技术获得的准确度和精密度。

使用反向方法时,观察到剂量之间的偏差更小,因此降低了误差。

由于吸头中的液柱更高,因此反向方法剂量更大,而高于剂量的液体量会排出更多。

第 5 步

吸液后和吸头离开液体之前,请暂停一秒钟。使此暂停操作尽可能保持一致。柱塞停止移动后,液体会在短时间内持续流入吸头。同时,在吸头内出现蒸发。暂停时间保持一致可以平衡这两种影响,并确保正确吸液。

第 6 步

吸液时,垂直握住移液器,然后将移液器从储液器中心直接移出。当移取少量(低于 50 µL)液体时,该技术尤为重要。将移液器从液体中移出时,以一定的角度握住移液器会改变吸取液体量。

第 7 步

轻轻握住移液器,并利用手指支托。每次移液后务必将移液器放回至移液器支架上。避免徒手操作移液器吸头或储液器。处理过程中传递的人体热量会破坏温度平衡,从而导致移液量出现偏差。

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