蛋白质免疫印迹转印缓冲液

预混转印缓冲液是确保凝胶转印的高质量和一致性的便捷方法。我们提供针对每种凝胶体系进行了优化的预混蛋白质免疫印迹转印缓冲液。使用下面的标签页查看用于蛋白质免疫印迹湿转或半干转的推荐转印缓冲液和转印条件，可根据凝胶体系进行选择。适用于湿转的推荐转印缓冲液配方也可在下方找到。

转印膜转印系统

用于 Bis-Tris 和 Tris-乙酸系统的推荐转印缓冲液

蛋白质样品	凝胶体系	转印缓冲液
宽分子量范围(6-400 kDa)	Bolt Bis-Tris Plus 预制胶	Bolt 转印缓冲液还原型样品：抗氧化剂
宽分子量范围(6-400 kDa)	NuPAGE Bis-Tris 预制胶	NuPAGE 转印缓冲液还原型样品：抗氧化剂
高分子量(40-500 kDa)	NuPAGE Tris-乙酸预制胶	NuPAGE 转印缓冲液还原型样品：抗氧化剂

使用Mini Blot Module 小型印迹模块（Mini Gel Tank电泳槽）的转印条件

凝胶类型	印迹膜	转印缓冲液	转印条件	预期电流*	运行时间
Bolt Bis-Tris Plus 预制胶	硝酸纤维素膜	含有 10％甲醇和抗氧化剂的 Bis-Tris 转印缓冲液用于还原型样品	10 V 恒定电压	起始：160 mA 结束：60 mA	1 小时
Bolt Bis-Tris Plus 预制胶	PVDF 膜		20 恒定电压	起始：340 mA 结束：130 mA	1 小时
NuPAGE Bis-Tris 预制胶	硝酸纤维素膜		10 V 恒定电压	起始：160 mA 结束：60 mA	1 小时
NuPAGE Bis-Tris 预制胶	PVDF 膜		20 V 恒定电压	起始：390 mA 结束：130 mA	1 小时
NuPAGE Tris-乙酸	硝酸纤维素膜		10 V 恒定电压	起始：150 mA 结束：50 mA	1 小时
NuPAGE Tris-乙酸	PVDF 膜		20 V 恒定电压	起始：380 mA 结束：130 mA	1 小时

* 电流读数代表运行一块凝胶时的值，可能会根据所用电源而变化。

使用 XCell II 印迹模块（SureLock 电泳槽）的转印条件

凝胶类型	印迹膜	转印缓冲液*	转印条件	预期电流**	运行时间
Bolt Bis-Tris Plus 和 NuPAGE Bis-Tris 预制胶	硝酸纤维素或 PVDF 膜	含有 10％甲醇和抗氧化剂的 Bis-Tris 转印缓冲液用于还原型样品	30 V 恒定电压	起始：170 mA 结束：100 mA	1 小时
NuPAGE Tris-乙酸	硝酸纤维素或 PVDF 膜	含有 10％甲醇和抗氧化剂的 Bis-Tris 转印缓冲液用于还原型样品	30 V 恒定电压	起始：220 mA 结束：180 mA	1 小时

*含 10% 甲醇的转印缓冲液可为在印迹模块中转印一块凝胶提供优化的转印条件。如果你正在转印 2 块凝胶，将甲醇含量增加到 20%，以确保转印效率。
** 电流读数代表转印一块凝胶时的值，可能会根据所用电源而变化。

Bolt Bis-Tris Plus 系统

NuPAGE 系统

蛋白质样品	凝胶体系	转印缓冲液
宽分子量范围(6-400 kDa)	Novex Tris-甘氨酸预制胶	Tris-甘氨酸转印缓冲液
低分子量(2.5-40 kDa)	Novex Tricine 预制胶

凝胶类型	印迹膜	转印缓冲液	转印条件	预期电流*	运行时间
Novex Tris-甘氨酸	硝酸纤维素膜	Tris-甘氨酸转印缓冲液含有 20% 甲醇	10 V 恒定电压	起始：70 mA 结束：50 mA	1 小时
PVDF 膜	20 V 恒定电压	起始：160 mA 结束：100 mA	1 小时
Novex Tricine 预制胶	硝酸纤维素膜	10 V 恒定电压	起始：70 mA 结束：60 mA	1 小时
PVDF 膜	20 V 恒定电压	起始：180 mA 结束：150 mA	1 小时

凝胶类型	印迹膜	转印缓冲液	转印条件	预期电流*	运行时间
Novex Tris-甘氨酸和 Novex Tricine 预制胶	硝酸纤维素或 PVDF 膜	Tris-甘氨酸转印缓冲液含有 20% 甲醇。在加入 SDS 或甲醇之前，1X 转印缓冲液的 pH 值应为 8.3。不要调整该 pH。	25 V 恒定电压	开始：100 mA	1-2 小时

用于半干式转印的推荐转印缓冲液

凝胶类型	转印缓冲液
所有凝胶体系	Power Blotter 1 -Step 转印缓冲液(5X) Pierce 1 -Step 转印缓冲液(1X)

1 -Step 转印缓冲液是一种高离子强度缓冲液，与配套的半干转系统一起使用时，可以在 5 分钟至 12 分钟内快速完成蛋白质转印。 1 -Step 转印缓冲液在使用合适的高电流电源条件下，可与 Power Blotter 或其他蛋白质半干转印装置兼容。此类设备需要能够提供恒定的高电流（1.3 至 5.0 安培），以在转印缓冲液的高离子强度条件下快速转印蛋白质。

使用 Power Blotter 系统的转印条件

凝胶尺寸	表面积(cm²)	恒定电流（A）	电压限值（V）	推荐转印时间（分钟）*
凝胶尺寸	表面积(cm²)	恒定电流（A）	电压限值（V）	低分子量	混合分子量	高分子量
1 小型凝胶	~60	1.3	25	5	7	10
2 小型或 1 中型凝胶	~120	2.5	25	5	7	10
3 小型凝胶	~180	3.8	25	5	7	10
4 小型或 2 中型凝胶	~240	5.0	25	5	7	10

*对于厚度超过 1 mm 的预制胶或手灌胶，延长 2 分钟的转印时间。

订购信息

转印缓冲液配方

提供以下转印缓冲液配方，帮助您从头开始制备缓冲液。所列 pH 值为每种缓冲液的 1X 工作液 pH 值。不要使用酸或碱调整 pH。

25X Tris-甘氨酸转印缓冲液

在 400 mL 超纯水中溶解下列试剂
试剂名称用量浓度（1X）
Tris Base 18.2 g 12 mM
甘氨酸 90 g 96 mM
充分混匀，使用超纯水将体积调整至 500 mL。
在转印之前，使用水稀释到 1X。
室温下缓冲液可以稳定保存 6 个月。

试剂名称	用量	浓度（1X）
Tris Base	18.2 g	12 mM
甘氨酸	90 g	96 mM

20X Bis-Tris 转印缓冲液

在 100 mL 超纯水中溶解下列试剂
试剂名称用量浓度（1X）
Bicine 10.2 g 25 mM
Bis-Tris (游离碱) 13.1 g 25 mM
EDTA 0.75 g 1 mL
充分混匀，使用超纯水将体积调整至 125 mL。
在转印之前，使用水稀释到 1X。
在 4°C 下时，缓冲液可以稳定保存 6 个月。

试剂名称	用量	浓度（1X）
Bicine	10.2 g	25 mM
Bis-Tris (游离碱)	13.1 g	25 mM
EDTA	0.75 g	1 mL

Bis-Tris, Tris-乙酸