Search Thermo Fisher Scientific
TPE 是一种利用多光子吸收对活体样本进行成像的光学过程,这种技术比传统的共焦显微镜检查的光毒性更低。双光子显微镜使用红外激发光进一步穿透到组织中,与在较长波长下激发相比,散射极小。对于荧光基团的每次激发,红外光的两个光子被吸收,激发仅限于微小的焦点体积,因此离焦荧光的影响较小。 双光子成像已应用于多种活细胞应用,包括离子浓度、细胞骨架组织、活性氧检测和囊泡再循环成像。 |
Molecular Probes® 荧光基团已在 TPE 应用中作为抗体、蛋白、葡聚糖或其他生物分子的偶联物经过了反复试验和测试。使用下面的列表选择具有最佳波长的荧光基团。表中显示了 TPE 激发波长——每项均列出了文献列表。通常,Alexa Fluor® 染料在研究细胞骨架组织或神经元追踪的实验中用作 TPE 的生物偶联物。与抗体偶联的 Qdot® 探针已用于免疫组织化学分析。根据各荧光基团的链接,您还可以找到目前可靶向您目标分子的所有相应生物偶联物;列表范围包括抗体和鬼笔环肽到生长因子和凝集素。如果您在列表中未找到所需的偶联物,链接中还包括活性染料表单或优化的标记试剂盒,您可借此创建自己的生物偶联物探针。
已有一系列 Molecular Probes® 离子指示剂用于 TPE 应用,主要用于神经元研究。Oregon Green® 488 BAPTA-1 已用于对大鼠脑中的钙信号转导进行成像;fura-2 和 X-rhod-1 已用于浦肯野细胞;Fluo-5F 已在关于树突和树突棘的出版物中得到引用。使用 TPE 进行的其他离子研究包括使用 SBFI 研究大鼠心肌细胞中的钠离子梯度和使用 MQAE 研究嗅觉神经元中的氯离子浓度。
下表显示了在 TPE 中使用的指示剂。您还可以看到按性能标准列出的用于常规成像应用的更多离子指示剂。
TPE 可用于利用多种指示剂检测活性氧的局部释放和细胞的氧化还原状态。具体而言,谷胱甘肽、H2O2 或广义氧化应激可以使用多种探针进行测量,这些探针已被证明适用于 TPE,并提供一系列波长选项。每个探针都包含文献列表和使用的 TPE 激发波长。
下表显示了在 TPE 中使用的指示剂。您还可以看到按性能标准列出的用于常规成像应用的更多活性氧指示剂。
Monochlorobimane | Amplex® Red | CM-H2DCFDA | |
---|---|---|---|
靶标 | 谷胱甘肽 | H2O2 | 氧化应激 |
参考文献 | 文献列表 | 文献列表 | 文献列表 |
TPE 激发 (nm) | 780 | 750或800 | 740 |
激光谱线 (nm) | 350 | 561 | 488 |
标准滤光片组 | DAPI | TRITC | FITC |
激发/发射波长 (nm) | 394/490 | 571/585 | 495/597 |
货号 | M1381MP | A12222 | C6827 |
TPE 显示良好结果的细胞结构探针包括细胞核染色剂、细胞膜染色剂和细胞示踪染料。细胞核染色剂可用于活细胞 (Hoechst 33342) 和固定 (DAPI) 细胞,两者均发蓝光并具有类似的 TPE 激发波长。细胞膜探针可提供红色(FM® 1-43 染料)或远红外 (DiD) 发射波长选择,细胞示踪染料范围从绿色到橙色。
下表显示了 TPE 中使用的探针,以及文献列表和 TPE 激发波长。您还可以看到按性能标准列出的用于常规成像应用的更多细胞结构探针。
DiD | FM® 1-43 | CFSE | CellTracker™ 橙色 | 荧光黄 | DAPI | Hoechst 33342 | |
---|---|---|---|---|---|---|---|
靶标 | 细胞膜 | 细胞膜 | 细胞示踪 | 细胞示踪 | 细胞示踪 | DNA | DNA |
参考文献 | 文献列表 | 文献列表 | 文献列表 | 文献列表 | 文献列表 | 文献列表 | 文献列表 |
TPE 激发 (nm) | 817 | 840 | 820 | 820 | 850 | 740 | 740 |
激光谱线 (nm) | 594/633 | 488 | 488 | 488 | 405 | 350/405 | 350/405 |
标准滤光片组 | Cy®5 | TRITC | FITC | TRITC | TRITC | DAPI | DAPI |
激发/发射波长 (nm) | 644/665 | 479/598 | 490/525 | 541/565 | 428/536 | 350/470 | 350/461 |
货号 | D7757 | T3163 | C1157 | C2927 | L453 | 查找产品 | H3570 |
| Molecular Probes® 手册 |
仅供科研使用,不可用于诊断目的。