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Arcturus® Paradise® PLUS 试剂系统可对数百万份先前无法获取的样本进行前所未有的基因表达分析。Paradise® PLUS 试剂系统是一种用于福尔马林固定石蜡包埋 (FFPE) 组织基因表达研究的集成式解决方案,其中含有用于组织染色、RNA 分离和 RNA 扩增的试剂。使用经过专门优化以克服交联模板挑战的方法,从低至 5 ng 的固定 RNA 中进行 RNA 扩增。
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这款试剂盒有两个版本,包括:
目前,从存档组织中获得了数千万份结果已知的组织样本。借助 Paradise® PLUS 试剂系统,研究人员可对先前无法获取的这些样本进行微阵列和 qRT-PCR 分析,这有助于进行回顾性研究,从而加快发现进程。
从样本到结果仅需六个步骤(图1)。
图1.获取基因表达结果的六个步骤。 |
Paradise® PLUS 试剂系统可与所有主流微阵列平台兼容。使用当今研究实验室中常用的工具和技术获得可靠且可重现的结果(图 2-5)。
图2.Paradise® PLUS 在 GeneChip® 人类基因组 X3P 阵列 (Affymetrix) 上的可重现性。对 FFPE 乳腺癌样本进行扩增。生成的双链 cDNA 用作体外转录 (IVT) 期间进行标记的模板。将复制的样本杂交到 GeneChip® 微阵列,得到强度相关系数 R=0.983。 |
图3.Paradise® PLUS 在 cDNA 阵列上的可重现性。用单独的激光捕获显微切割 FFPE 组织细胞进行两轮扩增。已扩增的 aRNA 在逆转录过程中进行标记,然后杂交到两个 cDNA 阵列,得到基因表达比值相关系数 R=0.993(log2 比值)。 |
图4.Paradise® PLUS 微阵列可重现性。用单独的激光捕获显微切割人乳腺细胞进行两轮扩增。将已标记的 aRNA 杂交到定制设计的 Agilent 微阵列,得到基因表达比值相关系数 R=0.986(log2 比值)。此外,还可在多种组织中进行可靠的扩增,从而提供适合标记并杂交到微阵列的微克级 aRNA。 |
图5.使用 Paradise® PLUS 试剂系统处理的样本。从 5,000–10,000 个激光捕获显微切割细胞开始,产生足以重复进行微阵列杂交的扩增 RNA。 |
并非所有 FFPE 样本都含有高质量 RNA。利用简单的实时 PCR 技术,为您的研究找到最佳样本,然后使用这些预先确认的样本信心十足地进行后续步骤(见图6)。
图6.实时结果确定了可在进一步实验中使用的优质样本。 |
Paradise® PLUS 试剂系统是一款少有的解决方案,它提供了从福尔马林固定石蜡包埋组织样本中制备 RNA 以进行基因表达分析所需的所有组分。为确保获得成功的微阵列结果,该系统包含了经过优化、可实现出色 RNA 回收和优异 RNA 扩增的试剂。
Paradise®PLUS试剂系统是Arcturus®微基因组学完整系统的一部分,是一种利用少量RNA进行基因表达分析的集成解决方案。该系统配备了 Arcturus 激光捕获显微切割 (LCM) 仪器来获取纯细胞群。适用于 Microgenomics® 的 Arcturus® 系统可实现准确、灵敏的微阵列测定,这些测定可揭示在全组织样本或细胞混合物中会被掩盖的分子特征。
仅供研究使用。不可用于诊断程序。