无论您是刚开始从事 siRNA 研究还是 siRNA 专家,您都将会认识到 Silencer™ 基因特异性 siRNA 对照品的便利性。各 Silencer 基因特异性 siRNA 对照品含有 50 µg 即用型化学合成且经凝胶纯化的 GAPDH、亲环蛋白、c-myc 或 ß-肌动蛋白 siRNA,足以完成 165 次转染(24 孔板)。此外,包括 25 µg 杂乱阴性对照 siRNA 和详细的说明书。各对照品经验证可用于人细胞系,且各批次均在 siRNA 实验中进行了功能测试。此外,GAPDH 和亲环蛋白 siRNA 经验证可用于小鼠细胞系。这些 siRNA 对照品适用于开发和优化 siRNA 实验。

订购信息

货号 产品名称 规格 单价 (CNY) 数量
AM1632 Silencer™ siRNA Labeling Kit with Cy™3 dye Each
16,181.00
AM4300 GAPDH Monoclonal Antibody (6C5) 100 µg
3,855.00
AM4302 beta Actin Monoclonal Antibody (AC-15) 100 µg
5,607.00

监测转染效率

因为转染效率较低是基因沉默实验不成功的最常见原因,所以优化转染条件至关重要。 Silencer 基因特异性 siRNA 对照品适用于此类应用,特别是当采用随 Silencer siRNA 标记试剂盒提供的简单程序对它们进行荧光标记时。转染至细胞后,可使用与我们的基因特异性 siRNA 对照品匹配的 Ambion 新型一抗之一,通过荧光显微镜检查将标记 siRNA 的摄取与基因沉默相关联(图 1)。

图 1.用于 siRNA 研究的 Ambion 一抗的特性。

与 Silencer 基因特异性对照品匹配的一抗

Ambion 可提供小鼠单克隆抗体,用于通过免疫荧光法检测 GAPDH、c-myc 和 ß-肌动蛋白。Ambion 已在免疫荧光实验中使用了这些一抗中的每一种,以检测 siRNA 诱导的蛋白水平降低情况。这种实验的示例见图 2。(抗体以 100 µg 单位规格的溶液形式提供,且经验证可用于免疫荧光实验。请注意,浓度和体积将因抗体而异)。

图 2.ß-肌动蛋白沉默后。使用 Silencer™ siRNA 标记试剂盒用 Cy™3 标记靶向 ß-肌动蛋白的 siRNA。将标记的 siRNA 转染至 HeLa 细胞中,并在 96 小时后进行细胞分析。绿色:用抗 ß-肌动蛋白 (Ambion) 和荧光素标记二抗检测到的 ß-肌动蛋白。红色:Cy3 标记 siRNA。蓝色:DAPI 染色细胞核。(Cy™3 是 Amersham Biosciences 的商标。)