无论您是刚开始从事 siRNA 研究还是 siRNA 专家，您都将会认识到 Silencer™ 基因特异性 siRNA 对照品的便利性。各 Silencer 基因特异性 siRNA 对照品含有 50 µg 即用型化学合成且经凝胶纯化的 GAPDH、亲环蛋白、c-myc 或 ß-肌动蛋白 siRNA，足以完成 165 次转染（24 孔板）。此外，包括 25 µg 杂乱阴性对照 siRNA 和详细的说明书。各对照品经验证可用于人细胞系，且各批次均在 siRNA 实验中进行了功能测试。此外，GAPDH 和亲环蛋白 siRNA 经验证可用于小鼠细胞系。这些 siRNA 对照品适用于开发和优化 siRNA 实验。

监测转染效率

因为转染效率较低是基因沉默实验不成功的最常见原因，所以优化转染条件至关重要。 Silencer 基因特异性 siRNA 对照品适用于此类应用，特别是当采用随 Silencer siRNA 标记试剂盒提供的简单程序对它们进行荧光标记时。转染至细胞后，可使用与我们的基因特异性 siRNA 对照品匹配的 Ambion 新型一抗之一，通过荧光显微镜检查将标记 siRNA 的摄取与基因沉默相关联（图 1）。

图 1.用于 siRNA 研究的 Ambion 一抗的特性。

与 Silencer 基因特异性对照品匹配的一抗

Ambion 可提供小鼠单克隆抗体，用于通过免疫荧光法检测 GAPDH、c-myc 和 ß-肌动蛋白。Ambion 已在免疫荧光实验中使用了这些一抗中的每一种，以检测 siRNA 诱导的蛋白水平降低情况。这种实验的示例见图 2。（抗体以 100 µg 单位规格的溶液形式提供，且经验证可用于免疫荧光实验。请注意，浓度和体积将因抗体而异）。

图 2.ß-肌动蛋白沉默后。使用 Silencer™ siRNA 标记试剂盒用 Cy™3 标记靶向 ß-肌动蛋白的 siRNA。将标记的 siRNA 转染至 HeLa 细胞中，并在 96 小时后进行细胞分析。绿色：用抗 ß-肌动蛋白 (Ambion) 和荧光素标记二抗检测到的 ß-肌动蛋白。红色：Cy3 标记 siRNA。蓝色：DAPI 染色细胞核。（Cy™3 是 Amersham Biosciences 的商标。）