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蛋白质-核酸相互作用
我们提供了多种灵敏易用的试剂盒，用于染色质免疫沉淀(ChIP)检测、电泳迁移率检测(EMSA)和DNA Pull-down检测。这些试剂盒可用于测定与DNA或RNA相互作用的蛋白质，分析发生相互作用的蛋白质种类，接下还可鉴定形成这些复合物所需的核酸序列，从而帮助我们最终理解特定细胞进程的调控过程。
- 更多选择—提供不同的研究策略，以便满足各种蛋白质-核酸间相互作用和下游分析需求
- 齐全—涵盖了应用所需的所有对照物和试剂
- 快速—所有试剂盒均可最大限度缩短制备和样品处理时间
哪种蛋白质-核酸相互作用产品最适合您？
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|---|---|---|---|---|---|
| LightShift化学发光DNA EMSA | MAGnify™染色质免疫沉淀体系 | Pierce琼脂糖ChIP试剂盒 | LightShift化学发光RNA EMSA | RNA蛋白质 Pull-down试剂盒 | |
| 检测目标 | 蛋白质-DNA相互作用 | 蛋白质-DNA相互作用 | 蛋白质-DNA相互作用 | 蛋白质-RNA相互作用 | 蛋白质-RNA相互作用 |
| 相互作用条件 | 体外 | 体内 | 体内 | 体外 | 体外 |
| 核酸标记方法 | 生物素 | 无需 | 无需 | 生物素 | 脱硫生物素（包含在试剂盒内 |
| 基质 | 无需 | Dynabeads 蛋白 A/G 磁珠 | ChIP级蛋白 A/G Plus琼脂糖 | 无需 | Pierce核酸相容型链霉亲和素磁珠 |
| 主要优势 | 非放射性检测 | 定量式 | 定量式 | 非放射性检测 | 可以富集低丰度靶标 |
| 检测方法 | 免疫印迹 | qPCR | qPCR | 免疫印迹 | 免疫印迹或质谱 |
| 制备和样品处理时间 | 4.5–5 hrs | 5.5 hrs | 7.5 hrs | <8 hrs | 3h（仅指手动操作时间） |
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蛋白质-核酸相互作用产品的特征数据
四种DNA:蛋白质复合物的化学发光EMSA
生物标记的DNA探针大小为21-25 bp。EBNA反应物添加了2.5% 甘油和0.05% NP-40；AP1反应物中添加了10%甘油。Oct-1、AP1和NF-κB 转录因子的来自HeLa细胞核提取物。试剂盒中提供EBNA-1提取物作为阳性对照。非标记竞争性冷探针与标记DNA探针摩尔数相差200倍。EBNA、Oct-1和AP1的X射线曝光时间为2分钟,NF-κB的曝光时间为5分钟。 |  |
相对于其他厂商的ChIP 级蛋白G琼脂糖，Thermo Scientific Pierce ChIP级蛋白A/G琼脂糖提高了ChIP检测的信号特异性并降低了背景信号。
甲醛交联之后，使用Pierce ChIP检测试剂盒的染色质制备模块制备HeLa细胞裂解液。使用抗RNA聚合酶(RNA Pol II)抗体或常规兔IgG (IgG)进行免疫沉淀。分别使用封闭或未封闭的Pierce 蛋白A/G Plus琼脂糖或其他两家厂商的ChIP级蛋白G琼脂糖捕捉抗体-抗原复合物。剩余其他步骤使用Pierce ChIP检测试剂盒进行。使用扩增毗邻GAPDH启动子区域的引物进行荧光定量PCR。
RNA-蛋白 Pull-down实验实例：突变对于雄激素受体3′-UTR RNA与HuR和Poly(C)BP结合能力的影响
依照试剂盒操作流程标记野生型和突变AR 3′-UTR RNA (50 pmol)并进行 Pull-down实验。根据体积对样品进行归一化处理。.L =上样裂解液；FT =流穿；E = 洗脱。 PCBP1抗体 (1:1000)。
四种DNA:蛋白质复合物的化学发光EMSA
生物标记的DNA探针大小为21-25 bp。EBNA反应物添加了2.5% 甘油和0.05% NP-40；AP1反应物中添加了10%甘油。Oct-1、AP1和NF-κB 转录因子的来自HeLa细胞核提取物。试剂盒中提供EBNA-1提取物作为阳性对照。非标记竞争性冷探针与标记DNA探针摩尔数相差200倍。EBNA、Oct-1和AP1的X射线曝光时间为2分钟,NF-κB的曝光时间为5分钟。 | |
相对于其他厂商的ChIP 级蛋白G琼脂糖，Thermo Scientific Pierce ChIP级蛋白A/G琼脂糖提高了ChIP检测的信号特异性并降低了背景信号。
甲醛交联之后，使用Pierce ChIP检测试剂盒的染色质制备模块制备HeLa细胞裂解液。使用抗RNA聚合酶(RNA Pol II)抗体或常规兔IgG (IgG)进行免疫沉淀。分别使用封闭或未封闭的Pierce 蛋白A/G Plus琼脂糖或其他两家厂商的ChIP级蛋白G琼脂糖捕捉抗体-抗原复合物。剩余其他步骤使用Pierce ChIP检测试剂盒进行。使用扩增毗邻GAPDH启动子区域的引物进行荧光定量PCR。
RNA-蛋白 Pull-down实验实例：突变对于雄激素受体3′-UTR RNA与HuR和Poly(C)BP结合能力的影响
依照试剂盒操作流程标记野生型和突变AR 3′-UTR RNA (50 pmol)并进行 Pull-down实验。根据体积对样品进行归一化处理。.L =上样裂解液；FT =流穿；E = 洗脱。 PCBP1抗体 (1:1000)。
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资源
仅供科研使用，不可用于诊断目的。